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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)

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更新時(shí)間:2016-12-30 14:43:15瀏覽次數(shù):304次

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適用領(lǐng)域 科研
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-培養(yǎng)冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

細(xì)胞名稱      tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)
形態(tài)特性       多角
生長(zhǎng)特性      貼壁生長(zhǎng)
特征特性       轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒,經(jīng)2.0ug/ml puromycin篩選,為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細(xì)胞系,受強(qiáng)力霉素Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細(xì)胞倍增時(shí)間為24小時(shí)。 
培養(yǎng)條件       DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法       1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況      
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      培養(yǎng)法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      B類
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)凍存過程:
將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。
公司出售細(xì)胞培養(yǎng)、人細(xì)胞培養(yǎng)、小鼠細(xì)胞培養(yǎng)、大鼠細(xì)胞培養(yǎng)等動(dòng)物細(xì)胞,幾乎能滿足多數(shù)客戶的實(shí)驗(yàn)要求。公司是廣大顧客細(xì)胞購(gòu)買理想的單位之一。細(xì)胞詳細(xì)參數(shù)如下:
1) 用途:提供用于科研的穩(wěn)定細(xì)胞系
2) 包裝規(guī)格:25cm*cm(>1000000個(gè)細(xì)胞)
3) 保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
4) 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無(wú)菌技術(shù)要點(diǎn):
1. 實(shí)驗(yàn)開始前,無(wú)菌室和無(wú)菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面,并且打開無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后,才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后,請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái),用70%再次擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無(wú)菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出,有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%擦拭后方可帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺(tái)面的中央無(wú)菌區(qū)域內(nèi)完成,請(qǐng)勿在邊緣非無(wú)菌區(qū)域進(jìn)行操作。
3. 小心取用無(wú)菌實(shí)驗(yàn)物品,避免細(xì)菌污染。請(qǐng)勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后,請(qǐng)用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全,必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無(wú)菌操作臺(tái)進(jìn)行(至少是Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無(wú)菌水,每周定時(shí)更換)。
5.3. 無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000小時(shí)/HEPA)。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
Axin 2    載脂蛋白A1抗體    APOA1
Axin1    β-抑制蛋白1抗體    Beta-arrestin 1
AXL    錨定蛋白B抗體    Ankyrin B
AXUD1    銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體    ATP7A
AZI1    單克隆/抗體    Amphetamine(2A3F)
Azurocidin    ASMTL蛋白抗體    ASMTL
B MyB    激素受體相關(guān)蛋白16抗體    TRA16
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)B3GALNT1    β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體    beta-Amyloid 1-40 (CT)
B4GALT7    含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體    ASB13
B7-DC    β淀粉樣肽/Aβ 31-35 抗體    beta Amyloid 31-35
B7-H1/PD-L1/CD274    β淀粉樣肽 1-40抗體    beta-Amyloid 1-40(CT)
B7H4    β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體    Beta arrestin 2
B7-H6    炭疽桿菌抗體    Anthrax
BA46    腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體    ACD
BAALC    血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體    Angiotensin II type 1A receptor
8000-34-8    20mg    Aprotinin 蛋白酶抑制劑(抑肽酶)
400603-95-4    20mg    Apramycin Sulfate 硫酸安普霉素
532-91-2    20mg    Apiin 芹菜苷
3621-36-1    20mg    Apiin 芹菜苷
546-97-4    20mg    Apigenin-7-O-glucronide 芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷
63644-62-2    10mg    Apigenin 芹菜素
23094-69-1    20mg    anti-β-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody
3877-86-9    10mg    anti-β-Tubulin Mouse Monoclonal antibody
17086-76-9    20mg    anti-β-actin Rabbit Polyclonal antibody
518-94-5    20mg    anti-β-Actin Mouse Monoclonal antibody
7295-85-4    20mg    anti-α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody
3843-74-1    20mg    anti-α-Tubulin Mouse Monoclonal antibody
491-71-4    5mg    anti-Myc Tag Mouse Monoclonal antibody
486-66-8    20mg    anti-His TagMouse Monoclonal antibody
552-66-9    20mg    anti-HIS Tag Rabbit Polyclonal antibody
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6培養(yǎng)售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決。

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