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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測(cè)試劑盒
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人降鈣素(CT)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Human calcitonin (CT) ELISA Kit |
貨號(hào) | YS-H11433 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗原 0.5mgSGLT1(sodium-glucose cotransporter1)
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗原 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2)
人癌胚抗原 0.5mgCEA
蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原) 0.5mgLumbrokinase
硫酯包含蛋白-1(抗原) 0.5mgThioster-containing protein 1
高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mgCD36L1/SRB1
嗎啡與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 5mgMorphine/KLH
熒光素Cy5.5標(biāo)記牛血清白蛋白 0.1mlBSA/Cy5.5
兔抗人IgG(γ-鏈)恒定區(qū)抗血清 0.5mlRabbit anti-human IgG heavy chain constant region whole serum
熒光素Cy3標(biāo)記牛IgG 0.1mlBovine IgG/Cy3
金標(biāo)記鏈霉親和素(10nm/15nm) 0.5mlStreptavidin/Gold
兔白介素6 96TIL-6 (Rabbit Interleukin 6) ELISA Kit
大鼠c-Jun氨基末端激酶 96TJNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit
病毒 IgM Ⅲ型(間接法二步法)ADV IgM III
人降鈣素(CT)ELISA檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測(cè)試劑盒 48T
轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒 48T
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
羊特定基因序列(Ovine)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
羊特定基因序列(Ovine)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 48T
雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
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