當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>公司動態(tài)>>干細胞污染的清除
培養(yǎng)干細胞一經(jīng)污染,多數(shù)較難處理。如果污染細胞價值不大,宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室,復(fù)蘇或重新購置細胞,再培養(yǎng)。
若污染細胞價值較大,又難于重新得到,可采取以下辦法清除。
一、細菌和真菌的清除
1、使用抗生素
抗生素對殺滅細菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素,污染后清除用藥需采用大于常用量5~10倍的沖洗法,于加藥后作用24~48小時,再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。
二、支原體的清除
1、用MRA處理
用MRA(Mycoplasma Removal Agent)處理細胞,每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細胞純潔健康,效果好.
2、用清洗純化法清除支原體污染的方法
細胞營養(yǎng)馴化→細胞群的篩選→細胞清洗→反復(fù)離心洗滌
其原理是利用離心力、細胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。由于支原體個體小且除發(fā)酵支原體外多為細胞外寄生,所以通過反復(fù)洗滌細胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。
如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用,可達到更好的效果。
3、藥物輔助加溫處理
先用藥物處理后,再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時,可殺死支原體,但對細胞有不良影響。
4、使用支原體特異性血清
干細胞用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,因特異抗體可抑制支原體生長,故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性,并且5個月后仍為陰性。但此法比較麻煩,不如用抗生素方便、經(jīng)濟。
111-83-1 1-溴代辛烷 英文名稱: 號: 1-Bromooctane
4276-49-7 1-溴甘二烷 英文名稱: 號: 1-Bromoicosane
112-29-8 1-溴癸烷;溴代正癸烷,癸基溴 英文名稱: 號: 1-BroModecane;n-Decyl broMide
111-75-1 1-溴己烷;正己基溴 英文名稱: 號: 1-BroMohexane;n-Hexyl broMide
131-91-9 1-亞硝基-2-萘酚;α-亞硝基-β-萘酚;鈷試劑 英文名稱: 號: 1-Nitroso-2-naphthol;1,2-Naphthoquinone-1-oxiMe;C.I. 10005
930-55-2 1-亞硝基吡咯烷;N-亞硝基吡咯烷 英文名稱: 號: 1-Nitrosopyrrolidine
143314-16-3 1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽 ≥98.5% 英文名稱: 號: 1-Ethyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate
68077-26-9 1-乙基-7-氯-6-氟-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸 英文名稱: 號: 1-ETHYL-7-CHLORO-6-FLUORO-1,4-DIHYDRO-4-OXOQUINOLINE-3-CARBOXYLIC ACID
干細胞
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