人正常組織來(lái)源細(xì)胞主要通過(guò)嵌在細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)與環(huán)境相互作用，這代表了產(chǎn)生和解釋細(xì)胞力的關(guān)鍵點(diǎn)。一些蛋白質(zhì)會(huì)響應(yīng)液體流動(dòng)對(duì)其產(chǎn)生的“推力”，就像在血管中的情況；而另一些蛋白質(zhì)在細(xì)胞被其鄰近細(xì)胞拖拽或黏附到其他鄰近蛋白質(zhì)時(shí)，產(chǎn)生與張力相關(guān)的信號(hào)。

20 世紀(jì) 90 年代，牽引力顯微鏡（TFM）出現(xiàn)，成為*個(gè)真正可以定量測(cè)量這種力的工具。 例如，1999 年，當(dāng)時(shí)供職于伍斯特麻省大學(xué)醫(yī)學(xué)院的 Yu-Li Wang 和附近波士頓大學(xué)的 Micah Dembo，將一種稱為成纖維細(xì)胞的結(jié)締組織細(xì)胞鋪在一種嵌入了熒光微珠的凝膠材料上。隨后他們展示了可以使用 TFM，通過(guò)測(cè)量微珠的位移來(lái)推算出這些細(xì)胞產(chǎn)生的力。德國(guó)埃爾朗根 - 紐倫堡大學(xué)的生物物理學(xué)家 Ben Fabry 說(shuō)：“這就像一個(gè)彈簧秤，你對(duì)彈簧秤施重并測(cè)量其變形程度，如果你知道彈簧的剛度，你就能確定力的大小。”

TFM 已經(jīng)成為研究單個(gè)細(xì)胞和組織樣互連細(xì)胞片層的標(biāo)準(zhǔn)方法。Clare Waterman 任職于馬里蘭州貝塞斯達(dá)的國(guó)家心臟肺血液研究所，她已經(jīng)使用 TFM 來(lái)研究細(xì)胞遷移，該過(guò)程在一定程度上由被稱為黏著斑的細(xì)胞結(jié)構(gòu)將自身粘連在周?chē)?xì)胞外基質(zhì)（ECM）上時(shí)所產(chǎn)生的力介導(dǎo)。

Waterman 小組開(kāi)發(fā)出了相關(guān)方法來(lái)增加 TFM 實(shí)驗(yàn)可以成像的微珠數(shù)量，以便產(chǎn)生超高分辨率的力圖。她說(shuō)：“我們可以在每個(gè)黏著斑下設(shè)置 50 個(gè)標(biāo)記物，所以我們可以達(dá)到亞微米級(jí)別的分辨率。”這使得她的小組能夠揭示在黏著斑處產(chǎn)生的力，是如何觸發(fā)在胚胎發(fā)育等過(guò)程中協(xié)調(diào)定向細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的分子事件。

當(dāng)然，微珠對(duì)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的響應(yīng)是一個(gè)多維移動(dòng)，這種多維移動(dòng)比一維的彈簧秤變形要復(fù)雜得多。TFM Z初需要強(qiáng)大的超級(jí)計(jì)算機(jī)來(lái)解讀數(shù)據(jù)，不過(guò)現(xiàn)代計(jì)算方法已經(jīng)使該技術(shù)更易使用。即使如此，將微珠的位移數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成力的測(cè)量仍然具有挑戰(zhàn)性，并且存在很多潛在的錯(cuò)誤源。Waterman 說(shuō)：“可能有一個(gè)單細(xì)胞在相反的方向拉，使它看起來(lái)基本上沒(méi)有形變。而且當(dāng)微珠的運(yùn)動(dòng)超出了細(xì)胞的邊界，就將很難處理。”

其他研究團(tuán)隊(duì)正在將 TFM 擴(kuò)展到三維，以更好地映射生物學(xué)上的實(shí)際情況。例如，F(xiàn)abry 和他的同事開(kāi)發(fā)了一種 TFM 方法，使用膠原蛋白構(gòu)成的凝膠，在三維跟蹤細(xì)胞力，膠原蛋白是 ECM 的一種關(guān)鍵的蛋白質(zhì)成分。他的團(tuán)隊(duì)能夠探測(cè)細(xì)胞產(chǎn)生的力、以及細(xì)胞通過(guò)一種合成的三維‘組織’時(shí)的速度和方向這幾者之間的關(guān)系——有望為癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)建模。

但他的方法也加大了對(duì)分析和計(jì)算的挑戰(zhàn)。Fabry 說(shuō)：“膠原蛋白是非常難處理的材料 — 它的行為是高度非線性的，也就是說(shuō)，如果你稍微拉伸它一點(diǎn)，它是柔軟的，但如果你多拉伸一點(diǎn)，它會(huì)突然變得非常僵硬。”

為了避開(kāi)這個(gè)計(jì)算上的負(fù)擔(dān)，新澤西州普林斯頓大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程師 Celeste Nelson 在她的器官發(fā)育研究中采用了較低分辨率的數(shù)據(jù)。她說(shuō)：“我們更關(guān)心的是在上百或上千人正常組織來(lái)源細(xì)胞的總數(shù)中找到力的大小的相對(duì)差異。然而，力的產(chǎn)生從根本上來(lái)說(shuō)是動(dòng)態(tài)的；需要在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集這些三維數(shù)據(jù)，她說(shuō)：“這樣計(jì)算量自然會(huì)暴增。”
HPLC≥98%    比枯枯靈；畢靈堿；荷包牡丹堿    (+)-Bicuculline    20mg/支
HPLC≥98%    異槲皮苷    Isoquercitrin;Isoquercetin; Isoquercitroside    20mg/支
HPLC≥98%    乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇醇靈堿    Acetylcorynoline    20mg/支
HPLC≥98%    三葉豆紫檀苷    Trifolirhizin;(-)-Maackiain-3-O-glucoside    20mg/支
HPLC≥98%    去氫二異丁香酚    Dehydrodiisoeugenol    20mg/支
HPLC≥98%    利卡靈-B；利卡靈B    (-)-Licarin B    20mg/支
HPLC≥98%    肉豆蔻木脂素    Myrislignan    20mg/支
HPLC≥98%    澤瀉醇B-23醋酸酯    Alisol B 23-acetate    20mg/支
HPLC≥98%    原花青素B2    Procyanidin B2    5mg/支
HPLC≥98%    人參皂苷F1    Ginsenoside F1    20mg/支
人正常組織來(lái)源細(xì)胞