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復(fù)蘇的凍存原代細(xì)胞存活率高

時間:2018-1-12閱讀:90
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在實(shí)際操作中,凍存的原代細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,復(fù)蘇之后再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟如下:

(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

(2)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內(nèi)使其*融化,然后在無菌下取出細(xì)胞。

(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代?;驘o需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

按照以上步驟復(fù)蘇的凍存原代細(xì)胞存活率高,生長及形態(tài)良好。
2280-89-9        50mg    " 
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三碘-N-甲基苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 
23515-45-9        50mg    鹽酸去乙酰地爾硫卓標(biāo)準(zhǔn)品
2410-93-7         50mg    甲氨蝶呤相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
256-96-2        50mg    卡馬西平相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
27244-64-0         50mg    左旋多巴相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
301359-05-7        50mg    丹曲林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
30536-19-7         50mg    替扎尼定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
3119-15-1        50mg    3-氨基-2,4,6-三碘苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品
3564-73-6        50mg    卡馬西平相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
原代細(xì)胞

 

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