ATCC細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>

(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇：

貼壁細(xì)胞一般用平底培養(yǎng)板。懸浮型細(xì)胞的培養(yǎng)一般用V型。

U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞 。V型培養(yǎng)板有時(shí)用做免疫學(xué)血凝集的實(shí)驗(yàn)。

不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用﹐但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少﹐如做克隆時(shí)﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐無論貼壁和懸浮細(xì)胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí)﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。V型板的用途更少﹐一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐為了使效靶細(xì)胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后﹐低速離心)如果是養(yǎng)細(xì)胞的話，通常是選用平底的， 另外要特別注意材質(zhì)， 標(biāo)示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養(yǎng)細(xì)胞用的。

圓底的好像沒聽說過拿來養(yǎng)細(xì)胞。 圓底的通常是拿來做分析， 化學(xué)反應(yīng)， 或是保存樣品用的， 因?yàn)閳A底比較好將液體吸得干凈，如果用平底的就不好吸了。 不過， 如果你是要測(cè)吸光值的話， 一定要買平底的才行。大部分細(xì)胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板，便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致，還便于MTT檢測(cè)。圓底培養(yǎng)板主要用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn)，需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng)，如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)”等。

(2)細(xì)胞培養(yǎng)常見問題與解答

問：我看到培養(yǎng)板有4、6、12、24、48、96孔幾種規(guī)格 ，但不知道到底什么實(shí)驗(yàn)用哪種規(guī)格。

答：要根據(jù)你具體的實(shí)驗(yàn)要求，流式一般用6孔，MTT一般用96孔，細(xì)胞爬片一般用24孔等，要具體根據(jù)你實(shí)驗(yàn)來定。

問：請(qǐng)問哪位高手知道Terasaki板是什么培養(yǎng)板，與普通細(xì)胞培養(yǎng)板有什么區(qū)別?

答：Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究，產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對(duì)晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法，兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ，特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于ATCC細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長(zhǎng)材料，同時(shí)還有l(wèi)ow binding surface，有關(guān)更多實(shí)驗(yàn)材料上的應(yīng)用與對(duì)材料的選擇。

問：我想測(cè)吸光度用酶標(biāo)儀，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板行嗎?請(qǐng)問酶標(biāo)板 多孔細(xì)胞培養(yǎng)板有什么區(qū)別?

答：用多空細(xì)胞培養(yǎng)板測(cè)吸光度肯定可以拉，我們經(jīng)常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測(cè)。

區(qū)別：酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴，細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng)，但也可以用來測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板，一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng)，它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè)，它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量：不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會(huì)影響氣體(氧氣)交換，而且在搬動(dòng)過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。

(3)細(xì)胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題

細(xì)胞培養(yǎng)板的加樣和操作：細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則，各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué)，不對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)造成額外的影響。這其中Z常見的問題就是如何保證加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。

問：96，24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細(xì)菌、霉菌等污染物會(huì)不會(huì)也隨著溜進(jìn)去呢?

答：1.蓋子很松，屬于半開放培養(yǎng)，這樣的目的是透氣(實(shí)際上是為了使培養(yǎng)皿外的co2能夠與培養(yǎng)皿充分交換，維持培養(yǎng)基的pH值)。

2.凡事有利必有弊，這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外這樣還會(huì)使培養(yǎng)皿內(nèi)的液體蒸發(fā)，這對(duì)于定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須清潔(定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關(guān)培養(yǎng)箱)b培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度必須始終保持為(培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽)。

就好像培養(yǎng)皿，也是一個(gè)蓋倒扣的容器，也不會(huì)污染。主要是因?yàn)樯w子“L”型邊緣產(chǎn)生氣流負(fù)壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chǎn)生負(fù)壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴(kuò)散，不會(huì)產(chǎn)生氣流，所以只會(huì)透氣不會(huì)透菌。

我使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超凈臺(tái)內(nèi))，而其它孔中還有細(xì)胞要培養(yǎng).我很擔(dān)心這樣會(huì)污染，不知道要注意什么?大家不知道有什么好的建議。

在超凈臺(tái)內(nèi)如果操作規(guī)范的話應(yīng)該可以的，我想你可以充分利用培養(yǎng)版的蓋子，盡量只暴露要操作的孔，將其它孔用蓋子蓋起來。這是我的一點(diǎn)粗淺的見解，拋磚引玉吧!

使用前綜合考慮一下，充分使用所以的孔;如果只需要使用少數(shù)的孔可以只用一邊的，其余用蓋子蓋住，我習(xí)慣于先用右側(cè)的孔(右手加樣方便)。

其實(shí)自己感覺只要注意ATCC細(xì)胞無菌操作，一般是不會(huì)污染的。操作時(shí)用幾塊玻片把板子一側(cè)墊高，不要把蓋子全打開，一般沒問題。