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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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不同細(xì)胞培養(yǎng)基存儲(chǔ)過程中的注意事項(xiàng)

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通常液體細(xì)胞培養(yǎng)基避免- 20 ℃凍存,因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出,影響培養(yǎng)效果;正常情況下于2℃~8℃避光保存,使用前從冰箱取出,放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存,其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解,如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良,可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期,對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后,也應(yīng)低溫(2℃~8℃)貯存,除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外,培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出。
在國(guó)內(nèi)傳統(tǒng)的生物制品過程中,配制的細(xì)胞培養(yǎng)基過濾后用轉(zhuǎn)瓶進(jìn)行分裝,為防止液體過濾及分裝時(shí)可能存在的污染性問題,常采用配制后于37℃擱置一段時(shí)間(7~14天),無(wú)菌方敢使用,但是對(duì)比試驗(yàn)顯示,低溫貯存的細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的效果好于37℃存貯,通常對(duì)于過濾設(shè)備的驗(yàn)證合格后,過濾過程中間隔取樣進(jìn)行無(wú)菌驗(yàn)證即可;并且大批量長(zhǎng)時(shí)間的高溫貯存除可能對(duì)營(yíng)養(yǎng)成份造成降解外,場(chǎng)地及高溫的保持也造成了成本的提高。目前,對(duì)于一些較大規(guī)模的生物制品,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)管道化配制、使用,污染的安全性明顯降低。
工業(yè)化中通常采購(gòu)干粉細(xì)胞培養(yǎng)基,與液體培養(yǎng)基相比,存儲(chǔ)方便且價(jià)格便宜,干粉細(xì)胞培養(yǎng)也應(yīng)長(zhǎng)期貯存在2~8℃,尤其是對(duì)于一些營(yíng)養(yǎng)豐富的低血清和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基,成份復(fù)雜且含量較高,有些成分的溶解性較低,過程中采用特殊的加工工藝提高其溶解性的同時(shí),如果長(zhǎng)期的高溫或低溫條件,也有可能改變其理化性質(zhì),在購(gòu)買或是使用過程中,須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行存儲(chǔ)。

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