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上海研生實(shí)業(yè)有限公司資料大小
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213次1.取6周左右的小鼠,剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml無(wú)菌的液體石蠟或巰基乙酸肉湯或4%淀粉肉湯。3~4天以后收集腹腔細(xì)胞。
2.如要收集腹腔靜置巨噬細(xì)胞,不注射刺激物,直接從這一步開(kāi)始。放血處死動(dòng)物,以減少腹腔中的紅細(xì)胞。消毒腹部,沿腹中線注入3~4ml冰中預(yù)冷的無(wú)菌PBS-H(含10U/ml肝素和10%小牛血清的PBS)。輕輕按腹部5分鐘。
3.以下均無(wú)菌操作。剪開(kāi)腹壁,用吸管吸出滲出液,再用同樣容量的預(yù)冷PBS-H沖洗腹腔2~3次。合并滲出液于離心管中,4℃離心250×g 10分鐘,去上清液。
4.用預(yù)冷的RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次,每次4℃離心250×g 10分鐘,去上清液。用預(yù)冷的適量RPMI-1640培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)細(xì)胞并決定細(xì)胞活力。
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