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306次原代細胞培養(yǎng)基本信息簡介
原代細胞來源于一塊碎的或酶消化的組織。原代培養(yǎng)物,是多種類型細胞的混合物,保留了其來源組織的特點。
一段時間后,原代培養(yǎng)的細胞會達到融合狀態(tài),即在培養(yǎng)瓶中的所有可用空間由于細胞擴增都被覆蓋。在此之后,細胞需要消化(通常用蛋白水解酶,如胰蛋白酶)為單個細胞并且傳代(分裂,傳代或轉(zhuǎn)移)。在*次傳代以后,培養(yǎng)物通常被稱為一個細胞系。每一次傳代培養(yǎng),細胞群體由于快速生長的細胞占主導地位而變得更均勻。具有所需特性的細胞也可以通過克隆,從培養(yǎng)物中選出。
二倍體細胞很少可以倍增超過幾代。它們只有有限的復制能力,并且在細胞倍增20至80次后開始減緩并Z終停止分裂。Z近的證據(jù)表明,某些細胞中觀察到的細胞衰老與預計的復制性衰老不同,可能是由于不適當?shù)呐囵B(yǎng)條件導致的。還有其他數(shù)據(jù)顯示,對某些物種的細胞系(尤其是人源的)即使生長在改進的培養(yǎng)條件下仍存在復制衰老。這種衰老是由細胞分裂時染色體末端(端粒)縮短調(diào)控的。
正如以上提到的,細胞系要么在培養(yǎng)瓶表面貼壁生長(錨定依賴性)要么懸浮生長(非錨定依賴性)。細胞的生長和分裂,通常遵循一個由四個階段組成的特征性增長模式:停滯期,對數(shù)期(指數(shù)期),平穩(wěn)期(平臺期)和衰退期。
停滯期——將細胞接種至培養(yǎng)瓶之后,細胞逐步恢復的同時,緩慢生長。
對數(shù)期(指數(shù)期)——細胞進入一個對數(shù)生長的時期,一直持續(xù)到整個生長表面被占滿或細胞密度超過培養(yǎng)基提供營養(yǎng)的能力。
平穩(wěn)期——細胞增殖減慢或停止。
衰退期——如果不更換培養(yǎng)基且細胞數(shù)量不減少,細胞活力會下降,并出現(xiàn)細胞死亡。
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