當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>流感病毒N4亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)?使用方法
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
四苯硼鈉/四苯基硼酸鈉/四苯硼酸鈉/NaTBPAR;99%,10克國產(chǎn)/進(jìn)口
氟化鈉/Sodium fluorideGR,99%,500克國產(chǎn)
氫氧化鈉/苛性鈉/燒堿/鈉氧條/苛性曹達(dá)/固堿/火堿/Sodium hydroxideGR,97%,500克國產(chǎn)
氟硼酸鈉/四氟硼鈉/四氟硼酸鈉/Sodium fluoroborateCP,98%,500克國產(chǎn)
六偏磷酸鈉/偏磷酸六鈉/格來漢氏鹽/卡甘/磷酸鈉玻璃/格臘哈姆鹽/六偏/六聚偏磷酸鈉/Sodium hexametaphoshpateCP,95%500克國產(chǎn)/進(jìn)口
萘酚AS-MX磷酸鹽/色酚AS-MX磷酸鹽/磷酸萘酚AS-MX/Naphthol AS-MX phosphate高純,99%500毫克國產(chǎn)/進(jìn)口
萘酚AS-BI磷酸二鈉/萘酚磷酸鈉/7-溴-N-(2-甲氧基苯基)-3-(磷酸氧基)萘-2-甲酰胺二鈉鹽/Naphthol AS-BI phosphate disodium saltBR,99.5%100毫克國產(chǎn)/進(jìn)口
單硬脂酸甘油酯/硬脂酸甘油酯/單甘酯/甘油單硬酯酸酯/十八酸甘油酯/GMSCP100克國產(chǎn)/進(jìn)口
丁二酸二甲酯/琥珀酸二甲酯/琥珀酸甲酯/Dimethyl succinateCP,98%100毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
乙酰乙酸甲酯/乙酰醋酸甲酯/丁酮酸甲酯/β-丁酮酸甲酯/3-丁酮酸甲酯/MAACP,98%500毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
對羥基苯甲酸甲酯/尼泊金甲酯/4-羥基苯甲酸甲酯/對羥基安息香酸甲酯/泊金M/尼泊金/Methyl 4-hydroxybenzoateCP,98.5%100克國產(chǎn)/進(jìn)口
月桂酸甲酯/十二酸甲酯/Methyl laurateAR,98%500毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
次亞麻酸甲酯/γ-亞麻酸甲酯/次亞麻酸子甲酯/次亞麻子油酸甲酯/(順,順,順)-6,9,12-十八碳三烯酸/γ-6,9,12-十八碳三烯酸甲酯/γ-Linolenic acid methyl esterFGC,98.5%5毫升EMK原裝
亞麻酸甲酯/順-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯/9,12,15-十八碳三烯酸甲酯/(順,順,順)-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯/Methyl linolenateAR,70%10毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
1,2-丙二醇/1,2-二羥基丙烷/甲基乙二醇/丙二醇/1,2-PropanediolAR,99%500毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
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