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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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怎樣避免人正常組織來源細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)黑點(diǎn)的產(chǎn)生?

時(shí)間:2018/7/3閱讀:203
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人正常組織來源細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中,滅活是很多朋友們?cè)谥攸c(diǎn)關(guān)注的一個(gè)問題,在查詢資料的時(shí)候甚至忽略了其它問題,我們今天來看看血清細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要怎樣防止黑點(diǎn)產(chǎn)品?
注意要點(diǎn):
1、化凍:
    將血清從-20 度冰箱中取出,室溫化凍。約需要30分鐘至2小時(shí),也可放于4度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時(shí)保存。
2、分裝:
① 轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中。恒遠(yuǎn)提醒注意:預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻;用吸液管或吹大管吹出血清時(shí)要注意:不要吹出氣泡。 
② 放入-20 度冰箱凍存。
③ 全部操作約需要4-6小時(shí)。

為防止黑點(diǎn)產(chǎn)生,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)的時(shí)候需要避免:
1、盡可能地減少血清凍融次數(shù)。 
2、培養(yǎng)基無需 37℃水浴。 
3、培養(yǎng)基保持 PH 值 7.0- 7.2。 
4、嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。 
5、掌握人正常組織來源細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。

 兔抗人、大、小鼠微管結(jié)合蛋白CYLDIgG 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1) 

 兔抗人、大、小鼠細(xì)胞分裂周期蛋白25IgG 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)

 兔抗人、大、小鼠腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2IgG 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)

 兔抗人、大、小鼠腺苷酸激酶IgG 大鼠纖連蛋白(FN) 

 兔抗人、大、小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體IgG 大鼠戊糖素(Pentosidine)

 兔抗人、大、小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D型VEGFDIgG 大鼠胃動(dòng)素(MTL)

 兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、CIgG 大鼠胃蛋白酶(PP)

 兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2IgG 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

 兔抗人、大、小鼠原癌基因Bcl-6IgG 大鼠維生素K1(VK1)

 兔抗人、大、小鼠著絲粒蛋白AIgG 大鼠維生素B12(VB12)

 兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(N端)IgG 大鼠維生素E(VE)
人正常組織來源細(xì)胞

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