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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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人正常組織來(lái)源細(xì)胞使用自動(dòng)高通量技術(shù)

時(shí)間:2018/5/3閱讀:189
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研究人員表示,人正常組織來(lái)源細(xì)胞該項(xiàng)工作表明可以使用自動(dòng)高通量技術(shù)同時(shí)測(cè)量iPS產(chǎn)生的RPE的多個(gè)基因表達(dá)情況,這意味著可以節(jié)省開(kāi)支,增加效率和產(chǎn)出。多通道芯片將被應(yīng)用到細(xì)胞的質(zhì)量檢查,并用于篩選有潛在療效的化合物,還將幫助改良RPE相關(guān)的細(xì)胞治療。

可促使干細(xì)胞形成RPE。為了驗(yàn)證iPS細(xì)胞產(chǎn)生的RPE,研究人員使用顯微鏡和生理功能檢測(cè)來(lái)確保再生組織的形態(tài)和功能的正常。研究人員還使用了定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)能反映細(xì)胞發(fā)育進(jìn)程和功能的基因表達(dá)水平,例如在iPS細(xì)胞中,SOX2基因表達(dá)比成熟的RPE更高,但定量RT-PCR只允許研究人員對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行幾個(gè)基因的同步測(cè)量。研究團(tuán)隊(duì)基于生物技術(shù)公司Affymetrix的商業(yè)化平臺(tái)開(kāi)發(fā)全新的多重測(cè)量芯片(assay)。該芯片能同時(shí)高度自動(dòng)化測(cè)量RPE樣本上多種基因的表達(dá)。在芯片中,小DNA片段被結(jié)合到小珠上來(lái)捕捉RPE樣本中細(xì)胞的基因所表達(dá)生成的RNA分子。一旦獲取,來(lái)自不同基因的RNA分子會(huì)被熒光標(biāo)記物標(biāo)記。

研究人員使用iPS技術(shù)誘導(dǎo)皮膚組織生成的RPE,然后檢測(cè)RPE中8種代表發(fā)育、功能、疾病的標(biāo)志基因的表達(dá)。研究團(tuán)隊(duì)使用定量RT-PCR技術(shù)同時(shí)檢測(cè)每個(gè)基因的RNA水平,然后使用多通路芯片同時(shí)檢測(cè)所有的基因,并比較iPS產(chǎn)生的RPE和iPS細(xì)胞以及RPE細(xì)胞的基因表達(dá)差別。相比iPS細(xì)胞,iPS產(chǎn)生的RPE的SOX2水平更低,而RPE特異基因PAX6、RPE65、RDH5、TRPM1和BEST1基因更高。相比人正常組織來(lái)源細(xì)胞培育的RPE,iPS產(chǎn)生的RPE的SOX2、PAX6基因表達(dá)水平更高(這兩種基因是發(fā)育相關(guān)標(biāo)記物),但RPE特異性基因水平較低,提示著不成熟的狀態(tài)。

111750-200601 鑒別 0.2ml 薏苡仁油

111751-200601 含量測(cè)定 20mg 派可林酸

111752-200601 含量測(cè)定 20mg 菊苣酸 

111754-200601 含量測(cè)定 20mg 羅漢果苷Ⅴ

111755-200601 含量測(cè)定 20mg 20(S)-原人參三醇

111757-200601 含量測(cè)定 20mg 二苯基庚烷A

111760-200601 含量測(cè)定 20mg 11-羰基-β-乙酰乳香酸

111761-200601 含量測(cè)定 20mg 桃葉珊瑚苷

111762-200601 含量測(cè)定 20mg 銀杏酸C15:1

111763-200601 含量測(cè)定 20mg 20(S)-人參皂苷F1

111764-200601 含量測(cè)定 20mg 20(S)-人參皂苷F2
人正常組織來(lái)源細(xì)胞

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