組成及試劑配制:
1、鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測(cè)試劑盒方法廠家酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè)，也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇：選用FAM通道。

ILF2/NF45/PRO3063 ELISA Kit白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體白介素增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA試劑盒

IRAK ELISA Kit白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒

IL-9 ELISA Kit細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體白介素9(IL-9)ELISA試劑盒

IL-8/CXCL8 ELISA KitCD19抗體白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒

IL-8 ELISA Kit環(huán)氧合酶2/前列腺素內(nèi)過氧化物合成酶2抗體白介素8(IL-8)ELISA試劑盒

IL-7 ELISA Kit白細(xì)胞分化抗原抗體CD2AP抗體白介素7(IL-7)ELISA試劑盒

IL－6 ELISA KitCD3/CD3-ε 抗體白介素6(IL－6)ELISA試劑盒

IL-6 ELISA Kit軟骨糖蛋白39抗體白介素6(IL-6)ELISA試劑盒

IL5RA ELISA Kit癌胚抗原抗體抗體白介素5受體alpha(IL5RA)ELISA試劑盒

IL-5 ELISA Kit癌胚抗原抗體相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒

IL-5 ELISA KitC型鈉尿肽抗體白介素5(IL-5)ELISA試劑盒

IL4R/CD124 ELISA Kit組織蛋白酶K抗體白介素4受體(IL4R/CD124)ELISA試劑盒

IL-4 ELISA Kit組織蛋白酶D抗體白介素4(IL-4)ELISA試劑盒

IL-37 ELISA Kit組織蛋白酶H抗體白介素37(IL-37)ELISA試劑盒

IL-35 ELISA Kit磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體白介素35(IL-35)ELISA試劑盒

IL-33 ELISA Kit磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體白介素33(IL-33)ELISA試劑盒

IL-32 ELISA Kit磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體白介素32(IL-32)ELISA試劑盒

IL-31 ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體白介素31(IL-31)ELISA試劑盒

IL-3 ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

ITK ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體白介素2誘導(dǎo)的T細(xì)胞激酶(ITK)ELISA試劑盒

IL-2R ELISA Kit磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒

IL2R ELISA Kit造血干細(xì)胞抗原抗體CD133抗體白介素2受體(IL2R)ELISA試劑盒

IL-2sRβ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框138抗體白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒

IL-2sRα/CD25 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框50抗體白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒

IL-29 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框151抗體白介素29(IL-29)ELISA試劑盒

IL-28B ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體白介素28B(IL-28B)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。