組成及試劑配制:
1、豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測(cè)試劑盒方法科研用酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè)，也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇：選用FAM通道。

SP-R ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒

SP ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

P-gp ELISA Kit蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒

P-cad ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒

P-TAU ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體P-TAU蛋白(P-TAU)ELISA試劑盒

PROM2 ELISA Kit胰輔脂酶抗體Prominin 2(PROM2)ELISA試劑盒

PL7 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒

PL12/AlaRS ELISA Kit過(guò)氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒

PSIP1 ELISA Kit核因子NFκB激活蛋白1抗體PC4,SFRS1互動(dòng)蛋白1(PSIP1)ELISA試劑盒

P53 ELISA Kit第12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框23抗體P53(P53)ELISA試劑盒

P38MAPK ELISA Kitγ-連環(huán)素/連接蛋白γ抗體P38蛋白激酶(P38MAPK)ELISA試劑盒

P27 ELISA Kit10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體P27蛋白(P27)ELISA試劑盒

P21 ELISA Kit10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體P21蛋白(P21)ELISA試劑盒

OX40L ELISA Kit10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框81抗體OX40配體(OX40L)ELISA試劑盒

OJ/IleRS ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒

AcSDKP ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒

NAG ELISA KitN-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒

NMDAR ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)ELISA試劑盒

N-Cad ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒

N-MID-OT ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒

Ext-N ELISA KitⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒

NT-proBNP ELISA Kit皮質(zhì)素1抗體N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒

Nogo-A Ab ELISA Kit8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒

NLR ELISA Kit胰羧肽酶E抗體NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒

NOX3/MOX2 ELISA Kit磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)ELISA試劑盒

/MOX1/ ELISA Kit20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框112抗體NADPH氧化酶1(/MOX1/)ELISA試劑盒

NHE3 ELISA Kit10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框88抗體Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒

CEL ELISA Kit富含半胱氨酸C端蛋白1抗體N(ε)羧乙基賴氨酸(CEL)ELISA試劑盒

MINA ELISA KitE1A激活基因刺激蛋白2抗體MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)ELISA試劑盒

mxd1 ELISA Kit細(xì)胞壁合成蛋白43抗體MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒

DUSP-1 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體MAP磷酸酶雙特異性磷酸酶1(DUSP-1)ELISA試劑盒

M2-PK ELISA Kit磷酸化p21蛋白抗體M2腎丙酮酸激酶(M2-PK)ELISA試劑盒

L-Selectin/CD62L ELISA Kit磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒

L-LDH ELISA Kit磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒

PAL ELISA Kit磷酸化周期素依賴性激酶2抗體L-苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒

PAL ELISA Kit磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒

LAO ELISA Kit磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體L-氨基酸氧化酶(LAO)ELISA試劑盒

Ki-67 ELISA Kit磷酸化α-連環(huán)蛋白抗體KI-67抗原(Ki-67)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。