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微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
麻疹孿生球菌 | 僅供科研 | GOY-01J7359
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
DDX58抗體Human TCF4(Transcription factor 4) ELISA Kit甘油醛-3-脫氫
DDX4抗體Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA KitSDS-PAGE蛋白質(zhì)次高分子標(biāo)準(zhǔn)
鴨瘟病DPV抗體Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT4-氟苯甲酸
交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit聚(1,4-丁二醇丁二酸)酯
腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒,ANP ELISA kit
DNA斷裂因子抗體(蛋白激活脫氧核糖核酸)Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA Kit人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒,Amylin ELISA kit
脫氧核糖核酸γ抗體Human MSRA(Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase) ELISA Kit人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒,HDV IgM ELISA
死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human COL4A3BP(Collagen type IV alpha-3-binding protein) ELISA Kit人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒,INH-A ELISA
麻疹孿生球菌1,1,2-三三氟乙烷(CFC-113)99.5%Mouse Anti-Guinea IgG 小鼠抗豚鼠IgG (親和層析純化)豬促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,1,2-三三氟乙烷(CFC-113 for HPLC, ≥99.5%Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素豬滑行蛋白α(TXLNa)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
一氟三 99.8%Rabbit Anti-Biotin 兔抗抗體IgG (親和層析純化)豬質(zhì)金屬蛋白-13(MMP-13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
化 AR,98%Rabbit Anti-Bovine IgG 兔抗牛IgG (親和層析純化)豬膽囊收縮素/縮膽囊素33肽(CCK-33)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
糠 AR,99%Rabbit Anti-Bovine IgM 兔抗牛IgM (親和層析純化)豬膽囊收縮素/縮膽囊素39肽(CCK-39)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
糠 ACS, 99%Rabbit Anti-Bovine TG 兔抗牛狀腺球蛋白 (親和層析純化)豬膽囊收縮素/縮膽囊素58肽(CCK-58)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
糠 standard for GC, ≥99.5% (GC)Rabbit Anti-chicken IgG 兔抗雞IgG (親和層析純化)豬抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
糠 ≥98%, FCCRabbit Anti-chicken IgM 兔抗雞IgM (親和層析純化)豬α1(Ta1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氨銨 97%Rabbit Anti-dog IgG 兔抗狗IgG (親和層析純化)豬早老素1(PS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氨銨 GRRabbit Anti-FITC 兔抗熒光素 (親和層析純化)豬垂體腺苷環(huán)化激活肽38(PACAP-38)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
L-羥脯氨 99%Rabbit Anti-Goat IgG 兔抗羊IgG (親和層析純化)豬垂體腺苷環(huán)化激活肽27(PACAP-27)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
L-賴氨 98%Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM (親和層析純化)豬生長激素受體(GHR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,1,2,2-四乙烷 AR,98%Rabbit Anti-Guinea IgG 兔抗豚鼠IgG (親和層析純化)豬粒巨噬集落激因子(GM-CSF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
六乙烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)Rabbit Anti-Guinea IgM 兔抗豚鼠IgM (親和層析純化)豬免疫球蛋白M(IgM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
六乙烷 ARRabbit Anti-horse IgG 兔抗馬IgG (親和層析純化)豬載脂蛋白A2(ApoA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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