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貨號(hào) | GOY-01X1097 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 原代細(xì)胞 | GOY-01X1097 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
2.組織來源:骨髓
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
5.方法簡介:
()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產(chǎn)品貨號(hào)CM-R131
換液頻率每2-3天換液一次
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣
傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液0.25%
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
10ku S1 核酸 Nuclease,S1 4℃保存 15.6-1000 pg/mL 人血小板源生長因子D(PDGF-D)ELISA試劑盒
1000mL TAE,50X TAE,50X 常溫保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Kelch-like protein 17
8次 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒 Bacterial Surface Protein Isolation Kit -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人MYC關(guān)聯(lián)因子X(MAX)ELI
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 DCLS Agar 250g
phospho-Stathmin 1 (Ser63) 磷酸化原基因蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1ml
50T 麻風(fēng)桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Cdc6 (Ser54) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-6 白介素6抗體 規(guī)格: 0.1mlDACH1 細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體 規(guī)格: 0.2ml
P4HB 蛋白二硫鍵異構(gòu)P4HB抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD93/C1qrp CD93抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ADRB2 (Ser261) 磷酸化上素能受體β2抗體 規(guī)格: 0.1ml
VGLL4 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體 規(guī)格: 0.2ml
BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
2 ug pMUTIN4 pMUTIN4 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
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