微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

3-甲氧基苯磺酰氯 96% ≥97% (HPLC)Anti-NSBP1/FITC  熒光素標(biāo)記核小體結(jié)合蛋白1抗體IgG

2-吡羧酸 98% 三氯化鉻(III) 六水合物 CP,98%Anti-NSE/FITC   熒光素標(biāo)記神經(jīng)元特異性烯化抗體IgG

氨水 AR,25-28%氯化鋇，二水 AR,99.5%Anti-Ntn1/FITC  熒光素標(biāo)記軸突導(dǎo)向因子1抗體IgG

氨水 CP,25-28%氯化鋇，二水 99.99% metals basisAnti-NT-3/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)營養(yǎng)因子-3抗體IgG

氨水 GR,25-28%氫氧化鋇，八水 CP，97%Anti-NT-4/NT-5 /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)生長因子4/5抗體IgG

氨水 for HPLC，≥25% in H2O氟化鈣 CP,98.0%Anti-NTCP/FITC  熒光素標(biāo)記鈉離子/?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白IgG

氨水 ACS, 28.0-30.0% NH3 in water二氧化硫脲 98%Anti-NTN/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)生長因子抗體IgG

氨水 ≥28% NH3 in H2O,電子級硫脲 AR，99%Anti-Nurr1/FITC  熒光素標(biāo)記核受體相關(guān)因子-1抗體IgG

泡盛曲霉醋鈀 AR，Pd 46.0 - 48.0 %Anti-NDRG4/FITC  熒光素標(biāo)記抑癌因NDRG4抗體IgG豬酯酰肌特異性脂Cβ1(PLCβ1/PI-PLC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

二(乙酰酮)鈀(II) Pd 34.9%Anti-Nebulin/FITC  熒光素標(biāo)記伴肌動(dòng)蛋白抗體IgG豬端粒逆轉(zhuǎn)錄(TERT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

氫氧化鈀 20% PdAnti-NEP/FITC  熒光素標(biāo)記腦啡肽抗體IgG豬蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)(PDI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

氫氧化鈀 10% PdAnti-Nephrin Protein/FITC  熒光素標(biāo)記去氧素抗體IgG豬微粒體S轉(zhuǎn)移1(MGST1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鉑炭催化劑 Pt 5%Anti-Ephrin B/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Ephrin B抗體IgG豬鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鈀硫鋇 5% Pd basisAnti-Ephrin B (phospho Tyr331) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗體IgG豬神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鈀硫鋇 10% Pd basisAnti-Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗體IgG豬生長分化因子5(GDF5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鈀碳 5%PdAnti-Ephrin B (phospho Tyr324/329) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗體IgG豬煙酰腺嘌呤二核苷氧化1(NOX1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鈀碳 10%PdAnti-Ephrin B (phospho Tyr317) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗體IgG豬神經(jīng)肽Y受體Y5(NPYR5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

醋銠(II)二聚體 RH：43.0%-46.6%Anti-Nestin/FITC  熒光素標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG豬賴氨酰氧化樣蛋白4(LOXL4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

銠黑 99.9% metals basisAnti-Nesfatin-1/Nucb2/FITC  熒光素標(biāo)記新的飽食分子蛋白抗體IgG豬質(zhì)衍生因子4(SDF-4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

氧化銠，無水 99.8% metals basis,Rh 81%Anti-Nestin/FITC  熒光素標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG豬趨化因子C-C-元配體1(CCL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

辛銠(II)二聚體 銠含量：26.5% Anti-Nestin/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG豬肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

化銠(III) Rh 21.3%Anti-Nestin/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記巢蛋白/神經(jīng)上皮干蛋白抗體IgG豬不對稱二精氨(ADMA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

三(二亞芐酮)二鈀，加合物 98%Anti-NeuN/FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)元核抗原抗體IgG豬GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒