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水泡病毒(SVDV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用說(shuō)明書(shū)
豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測(cè)試劑盒費(fèi)用科研用
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
組成及試劑配制:
1、阿洛夫奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 價(jià)格 |
阿洛夫奧斯特線(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Ostertagia orloffiPCR | 電詢(xún) |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書(shū)。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。
MMP15 ELISA Kit腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)ELISA試劑盒
MMP14 ELISA Kit神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6a基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)ELISA試劑盒
MMP13 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體101抗體基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)ELISA試劑盒
MMP12 ELISA Kit胰高血糖素樣肽-1受體/GLP-1受體抗體基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒
MMP10 ELISA Kit糖磷脂酰肌醇抗體基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)ELISA試劑盒
MMP1 ELISA Kit磷酸化gp130抗體基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA試劑盒
MGP ELISA Kit谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶ζ1抗體基質(zhì)Gla蛋白(MGP)ELISA試劑盒
LUM ELISA Kit甘胺酸-N-?;D(zhuǎn)移酶抗體基膜聚糖(LUM)ELISA試劑盒
SLN ELISA Kit甘胺酸-N-?;D(zhuǎn)移酶樣1抗體肌脂蛋白(SLN)ELISA試劑盒
SSPN ELISA Kit 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體肌長(zhǎng)蛋白(SSPN)ELISA試劑盒
FBN3 ELISA Kit磷酸化葡萄糖合成酶1抗體肌原纖蛋白3(FBN3)ELISA試劑盒
FBN2 ELISA Kit糖原蛋白1肌原纖蛋白2(FBN2)ELISA試劑盒
FBN1 ELISA Kit生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒
MYOZ3 ELISA Kit生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白14抗體肌原調(diào)節(jié)蛋白3(MYOZ3)ELISA試劑盒
MYOZ2 ELISA KitHBeAg結(jié)合蛋白4/甘油激酶抗體肌原調(diào)節(jié)蛋白2(MYOZ2)ELISA試劑盒
MYOZ1 ELISA Kit甘胺酸-N-?;D(zhuǎn)移酶樣2抗體肌原調(diào)節(jié)蛋白1(MYOZ1)ELISA試劑盒
DAG1 ELISA Kit磷脂?;嫉鞍拙厶?抗體肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)ELISA試劑盒
DMD ELISA Kit氧化還原酶GlyR1/核蛋白60抗體肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白(DMD)ELISA試劑盒
MYOC ELISA Kit神經(jīng)鞘脂激活蛋白3抗體肌纖蛋白(MYOC)ELISA試劑盒
MTM1 ELISA Kit甘露糖脫水酶GMDS抗體肌微管素1(MTM1)ELISA試劑盒
CDH15 ELISA Kit糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體肌微管鈣黏附蛋白(CDH15)ELISA試劑盒
MSE ELISA Kit糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體肌特異性烯醇化酶(MSE)ELISA試劑盒
SGCζ ELISA Kit膠漿成熟因子γ/GMF-γ抗體肌糖ζ(SGCζ)ELISA試劑盒
SGCε ELISA Kit谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶GMPS抗體肌糖ε(SGCε)ELISA試劑盒
SGCδ ELISA KitGDP甘露糖焦磷酸化酶B抗體肌糖δ(SGCδ)ELISA試劑盒
SGCγ ELISA KitG蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1肌糖γ(SGCγ)ELISA試劑盒
SGCβ ELISA Kit葡萄糖6-磷酸脫氨酶1抗體肌糖β(SGCβ)ELISA試劑盒
SGCα ELISA Kit葡萄糖6-磷酸脫氨酶2抗體肌糖α(SGCα)ELISA試劑盒
CNDP2 ELISA Kit葡萄糖6-N-乙?;D(zhuǎn)移酶1抗體肌肽酶2(CNDP2)ELISA試劑盒
CNDP1 ELISA Kit谷氨酰胺酶1抗體肌肽酶1(CNDP1)ELISA試劑盒
CARNS1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體肌肽合酶1(CARNS1)ELISA試劑盒
CRT ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體肌酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CRT)ELISA試劑盒
CKMB ELISA KitG蛋白通路抑制物蛋白2抗體肌酸激酶MB同工酶(CKMB)ELISA試劑盒
MYOT ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR177蛋白抗體肌收縮蛋白(MYOT)ELISA試劑盒
MYNN ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體肌神經(jīng)蛋白(MYNN)ELISA試劑盒
MSTN ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體肌肉生長(zhǎng)抑制素(MSTN)ELISA試劑盒
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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