組成及試劑配制:
1、巴西諾卡菌PCR檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

JUP ELISA KitG蛋白α抑制劑抗體連接橋粒斑珠蛋白(JUP)ELISA試劑盒
JAM3 ELISA KitG蛋白受體α x+z抗體連接附著分子3(JAM3)ELISA試劑盒
JAM1 ELISA Kit半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體連接附著分子1(JAM1)ELISA試劑盒
JPH4 ELISA Kit磷酸化葡萄糖合成酶1抗體連接蛋白4(JPH4)ELISA試劑盒
JPH3 ELISA Kit半乳糖凝集素3抗體連接蛋白3(JPH3)ELISA試劑盒
JPH2 ELISA Kit生長因子受體結(jié)合蛋白7抗體連接蛋白2(JPH2)ELISA試劑盒
JPH1 ELISA Kit糖基轉(zhuǎn)移酶1結(jié)構(gòu)域1抗體連接蛋白1(JPH1)ELISA試劑盒
CTNNδ2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體LGR7蛋白抗體連環(huán)蛋白δ2(CTNNδ2)ELISA試劑盒
CTNNδ1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體MRGX2蛋白抗體連環(huán)蛋白δ1(CTNNδ1)ELISA試劑盒
CTNNβ1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體RDC1蛋白抗體連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA試劑盒
CTNNα3 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體TAS1R1蛋白抗體連環(huán)蛋白α3(CTNNα3)ELISA試劑盒
CTNNα2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體連環(huán)蛋白α2(CTNNα2)ELISA試劑盒
CTNNα1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR157蛋白抗體連環(huán)蛋白α1(CTNNα1)ELISA試劑盒
GSANA ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GSANA)ELISA試劑盒
GCP2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR10蛋白抗體粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP2)ELISA試劑盒
GCSFR ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體粒細(xì)胞集落刺激因子受體(GCSFR)ELISA試劑盒
GCA ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體EX33蛋白抗體粒鈣蛋白(GCA)ELISA試劑盒
NPR3 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR102蛋白抗體利鈉肽受體3(NPR3)ELISA試劑盒
NPR2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR37樣蛋白1抗體利鈉肽受體2(NPR2)ELISA試劑盒
NPR1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR105蛋白抗體利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒
VN1R5 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR12蛋白抗體犁鼻1受體5(VN1R5)ELISA試劑盒
VN1R4 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR110蛋白抗體犁鼻1受體4(VN1R4)ELISA試劑盒
VN1R3 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR125蛋白抗體犁鼻1受體3(VN1R3)ELISA試劑盒
VN1R2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體犁鼻1受體2(VN1R2)ELISA試劑盒
VN1R1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體犁鼻1受體1(VN1R1)ELISA試劑盒
LPHA ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體脂肪酶A(LPHA)ELISA試劑盒
TPSδ1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體胰蛋白酶δ1(TPSδ1)ELISA試劑盒
TPSγ1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體胰蛋白酶γ1(TPSγ1)ELISA試劑盒
TPSβ2 ELISA Kit細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體胰蛋白酶β2(TPSβ2)ELISA試劑盒
TPS ELISA Kit磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體胰蛋白酶(TPS)ELISA試劑盒
SF1 ELISA Kit磷酸化接頭蛋白Gab2抗體固醇生成因子1(SF1)ELISA試劑盒
STS ELISA Kit干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體固醇硫酸酯酶同工酶S(STS)ELISA試劑盒
STAR ELISA Kit磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體固醇合成急性調(diào)節(jié)蛋白(STAR)ELISA試劑盒
SRD5α2 ELISA Kit多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13抗體固醇5α還原酶2(SRD5α2)ELISA試劑盒
CSNK1δ ELISA Kit銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體酪蛋白激酶1δ(CSNK1δ)ELISA試劑盒
CSN3 ELISA Kit半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化酶抗體酪蛋白κ(CSN3)ELISA試劑盒
CSN2 ELISA Kit半乳糖凝集素10抗體酪蛋白β(CSN2)ELISA試劑盒
CSN1 ELISA Kit半乳糖激酶2抗體酪蛋白α(CSN1)ELISA試劑盒
TYR ELISA Kit半乳糖脫氫酶抗體酪胺酸酶(TYR)ELISA試劑盒
TAT ELISA Kit硫酸軟骨素裂解酶抗體酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶(TAT)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。