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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
開菲爾乳桿菌 | 僅供科研 | GOY-01J6532 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
人乙?;?/span>Bacillus cereus胃腸癌標(biāo)志物CA199檢測試劑盒
人異檸檬酸脫氫Bacillus cereus胃蛋白檢測試劑盒
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人葡萄糖6異構(gòu)Bacillus cereus
開菲爾乳桿菌高鈉,無水 99.99% metals basis人前膠原C內(nèi)肽增強子1(PCOLCE1)免疫試劑盒富含半胱氨C端蛋白1抗體Phospho-SGK1 (Ser422) 化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激1抗體
高鈉,無水 for HPLC,99.0% 人前膠原C端肽(PCP)免疫試劑盒E1A激活因激蛋白2抗體Phospho-SEK1/MKK4 (Thr261) 化絲裂原活化蛋白激激4抗體
高鈉,一水 ACS, 98%人前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)免疫試劑盒壁合成蛋白43抗體Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261) 化絲裂原活化蛋白激激4抗體
鈉 CP, ≥98.0%人前病整合位點1(Pim1)免疫試劑盒19號染色體開放閱讀框29抗體Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) 化絲裂原活化蛋白激激4抗體
3-O--D-葡萄糖 99%人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)免疫試劑盒化p21蛋白抗體phospho-SCNN1B(Thr615) 化上皮鈉通道β2抗體
過硫氫 ≥47% KHSO5 basis人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)免疫試劑盒化周期檢測點激2抗體phospho-SCNN1B(Ser633) 化上皮鈉通道β2抗體
二氨酰 97%人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)免疫試劑盒化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體Phospho-SATB1 (Ser47) 化核質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體
3-硝-4-氨酚 98%人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒化周期素依賴性激2抗體Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 化S6核糖體蛋白抗體
4-硝鄰二 97%人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)免疫試劑盒化周期檢測點激1抗體Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 化S6核糖體蛋白抗體
納米三鐵(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型人葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒化P27抗體/周期素依賴激抑制劑抗體phospho-RUNX3(Ser338) 化Runx3抗體
納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形人葡萄糖6異構(gòu)(GPI)免疫試劑盒化α-連環(huán)蛋白抗體phospho-RUNX2(Ser451) 化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體
納米99.8%,60nm,銳鈦,親水人葡萄糖6脫氫(G6PD)免疫試劑盒周期素E2抗體phospho-RUNX1(Ser266) 化急性髓白血病1蛋白抗體
烯硫 99%人葡萄糖-6-/葡萄糖-6-酯(G-6-Pase)免疫試劑盒化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體phosphor-SMAD2(Ser425) 化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體
烯二硫 90%人破傷風(fēng)(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒腫瘤易感候選因3抗體Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體
2-乙酰吡咯 99%人蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒化腫瘤易感候選因3抗體Phospho-RSK3 (Thr353/356) 化核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體
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