組成及試劑配制:
1、副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應(yīng)管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

δLK1 ELISA Kit白細(xì)胞介素-10抗體δ樣蛋白1同源物(δLK1)ELISA試劑盒
δSIP ELISA Kit白介素6抗體δ-促睡眠肽(δSIP)ELISA試劑盒
γGT1 ELISA Kit磷酸化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(γGT1)ELISA試劑盒
γGH ELISA Kit白細(xì)胞介素28受體抗體γ-谷氨酰水解酶(γGH)ELISA試劑盒
γGT7 ELISA KitKB抑制蛋白激酶Ζ抗體γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶7(γGT7)ELISA試劑盒
γGT6 ELISA Kit胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶6(γGT6)ELISA試劑盒
γGT5 ELISA Kit整合素β1結(jié)合蛋白2抗體γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶5(γGT5)ELISA試劑盒
γGT3 ELISA Kit線粒體翻譯起始因子3抗體γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)氨酶3(γGT3)ELISA試劑盒
γGT2 ELISA Kit白細(xì)胞介素27β抗體γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶2(γGT2)ELISA試劑盒
γGCT ELISA Kit胰島素樣生長因子1受體抗體γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移酶(γGCT)ELISA試劑盒
γLPH ELISA KitFBXL11蛋白抗體γ-促脂解激素(γLPH)ELISA試劑盒
γABA ELISA Kit免疫球蛋白超家族成員21抗體γ-氨基丁酸(γABA)ELISA試劑盒
βTG ELISA Kit白介素9抗體β-血小板球蛋白(βTG)ELISA試劑盒
βTC ELISA Kit乙酰乳酸合成酶蛋白抗體β細(xì)胞素(βTC)ELISA試劑盒
βACE2 ELISA Kit異檸檬酸脫氫酶1抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA試劑盒
βACE1 ELISA KitIKK激酶相互作用蛋白抗體β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA試劑盒
OHβ ELISA Kit磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體β-羥丁酸(OHβ)ELISA試劑盒
βEP ELISA Kit白介素8抗體β-內(nèi)啡肽(βEP)ELISA試劑盒
βCTx ELISA KitIroquois同源蛋白5抗體β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)ELISA試劑盒
βLPH ELISA Kit整合素αE抗體Integrin αEβ-促脂素(βLPH)ELISA試劑盒
β2M ELISA Kit細(xì)胞間粘附分子-2抗體β2-微球蛋白(β2M)ELISA試劑盒
β4GALT1 ELISA Kit整合素β3抗體β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(β4GALT1)ELISA試劑盒
β4GALNT2 ELISA Kit整合素α4抗體β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶2(β4GALNT2)ELISA試劑盒
β3GAT1 ELISA Kit白介素15抗體β-1,3-葡糖醛酸基移酶1(β3GAT1)ELISA試劑盒
αHSP ELISA Kit磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)ELISA試劑盒
αLA ELISA Kit一氧化氮合成酶-2抗體α-乳清蛋白(αLA)ELISA試劑盒
αEP ELISA Kit干擾素α6抗體α-內(nèi)啡肽(αEP)ELISA試劑盒
αMSH ELISA Kit整合素β2/Integrin β2抗體α-黑色素細(xì)胞刺激素(αMSH)ELISA試劑盒
αCTx ELISA Kit抑制素A/Inhibin βA抗體α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)ELISA試劑盒
SPTAN1 ELISA Kit胰島素受體底物-3抗體α-胞襯蛋白(SPTAN1)ELISA試劑盒
AFM ELISA Kit胰島素受體底物p53蛋白抗體α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒
α2PI ELISA Kit胰島素受體底物-1抗體α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)ELISA試劑盒
α2ML1 ELISA Kit胰島素受體底物-2抗體α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA試劑盒
α2M ELISA Kit胰島素受體底物-4抗體α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒
αHSG ELISA Kit白介素14抗體α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒
α1M ELISA Kit腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒
α1AGP ELISA KitCaspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒
α1ACT ELISA Kit胰島素受體α抗體α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA試劑盒
α1AT ELISA Kit整合素α3β1抗體α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒
α1BG ELISA Kit整合素β7抗體α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒
ZIN ELISA Kit支架蛋白抗體Zinedin蛋白(ZIN)ELISA試劑盒
EZH2 ELISA Kit非洲爪蟾IGC抗體Zeste同源物增強(qiáng)子2(EZH2)ELISA試劑盒
EZH1 ELISA Kit干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)ELISA試劑盒
SUZ12 ELISA Kit干擾素β抗體Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA試劑盒
Tβ4Y ELISA Kitγ-干擾素/γ-IFN單克隆抗體Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA試劑盒
PYY3 ELISA Kit干擾素-γ/IFN-γ抗體YY肽3(PYY3)ELISA試劑盒

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。