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牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒說明書注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:
2. 重現(xiàn)性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 兩管式 RT-PCR,一次 RT 反應產物可以作為多次 PCR 的模板。本試劑盒提供 10 次的 RT 反應試劑和 50 次的 PCR 試劑。
3. 引物經過優(yōu)化,特異性高,引物是根據(jù)基因的保守區(qū)域設計,適用于所有強、中、弱新城疫毒株,產物長度為 421 bp。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
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