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產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 a
技術(shù)原理:
即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒品牌 DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
以下是即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒品牌的相關(guān)產(chǎn)品。
Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚蛋白規(guī)格: 48T
Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 人多藥耐藥相關(guān)蛋白規(guī)格: 48T
Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit 人高速泳動蛋白17規(guī)格: 48T
Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELI?益?闃招孩?ú濄摯??栥荲???????螺????谻
19號染色體開放閱讀框77抗體C19orf77山竹子素:78824-30-3規(guī)格:HPLC≥98%;20mg芐星青霉素標準品進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Penicillin G Benzathine 規(guī)格:200mg:41372-02-5
核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體C1D異桑葉生物堿:169105-89-9規(guī)格:HPLC≥98%;20mg青霉素鉀標準品進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Penicillin G Potassium 規(guī)格:200mg:113-98-4
1號染色體開放閱讀?益?闃招孩?ú濄摯??栥荲???????螺????谻
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:
2. 重現(xiàn)性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 兩管式 RT-PCR,一次 RT 反應(yīng)產(chǎn)物可以作為多次 PCR 的模板。本試劑盒提供 10 次的 RT 反應(yīng)試劑和 50 次的 PCR 試劑。
3. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性高,引物是根據(jù)基因的保守區(qū)域設(shè)計,適用于所有強、中、弱新城疫毒株,產(chǎn)物長度為 421 bp。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
人鼻病毒通用PCR檢測試劑盒品牌 | Human Rhinovirus PCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應(yīng)。
4. PCR擴增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
Cyanidin 3-arabinoside chloride花青素3-阿拉伯糖苷human major vault protein,MVP ELISA Kit 人主要穹窿蛋白規(guī)格: 48T
Cyanidin 3-galactoside chloride矢車菊素半糖苷human ubiquitin D,UBD ELISA Kit 人泛素蛋白D規(guī)格: 48T
Cyanidin 3-O-sophoroside chloride化花青素-3-槐糖苷human toll-like receptor 2,TLR?益?闃招孩?ú濄摯??栥荲???????螺????谻
人鼻病毒通用PCR檢測試劑盒品牌CD7抗體CD7鬧羊花毒素III:26342-66-5規(guī)格:HPLC≥98%;20mg奧芬那君相關(guān)物質(zhì)C標準品進口、國產(chǎn)英文名稱16:20規(guī)格:20mg:10488-36-5
尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體CDX2鬧羊花毒素II:26116-89-2規(guī)格:HPLC≥98%;20mg磷酸奧斯他韋標準品進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Oseltamivir Phosphate規(guī)格:200mg:204255-11-8
CD68抗體CD6811-O-異?;?12-O-?;P(guān):126025?益?闃招孩?ú濄摯??栥荲???????螺????谻
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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