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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類(lèi)孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類(lèi)的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

羥基萘酚藍(lán) IND,94%(HPLC)2-氯-5-硝基二苯甲酮  98%Anti-P53/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因抗體（野生型P53）IgG

對(duì)羥基  97%Anti-Mtp53/FITC  熒光素標(biāo)記突變型P53抗體IgG

鉻酸鉛 AR,98.0%(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘  >99%, ee >98%Anti-P53(wt-p53)/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因抗體（野生型P53）IgG

甲基二酰氯 97%(R)-(-)-1,2,3,4-四氫-1-萘  >99%, ee >98%Anti-wtp53/FITC  熒光素標(biāo)記野生型p53單克隆抗體IgG

鎂試劑Ⅰ 高純級(jí),90%1, 2-二氯-3-代苯 97%Anti-p53BP1/53BP1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgG

米吐?tīng)?/span> AR,99.0%5-甲基異噁唑-3-羧酸甲酯 98%Anti-p53BP1(Ser25/29) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化p53結(jié)合蛋白1抗體IgG

四氧化三錳 SPAmberlyst® 15離子交換樹(shù)脂 干Anti-phospho-P53 (Ser15) /FITC  熒光素標(biāo)記化腫瘤抑制基因P53抗體IgG

硫代鎂 超純級(jí)2-溴-4-硝基咪唑 98%Anti-phospho-P53 (Ser37) /FITC  熒光素標(biāo)記化腫瘤抑制基因P53抗體IgG

淺黃假單胞菌水中鈣鎂成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Ca：20602mg/L  Mg:77.252mg/L 硬度:5Mouse trypsin ELISA Kit  小鼠胰蛋白豚鼠血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

水中鈣鎂成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Ca:2858mg/L Mg:90.50mg/L 硬度:7510mODF(Mouse osteoclast differentiation factor) ELISA Kit  小鼠破骨分化因子豚鼠去唾液糖蛋白受體1(ASGR1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

水中成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 59μg/mL，體:0.1mol/L NaOHTLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA kit  小鼠Toll樣受體9豚鼠脂酰絲氨(PS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)耗氧量(需氧量)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1000mg/L,體:0.1NH2SO4Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit  小鼠鉤端螺旋體IgG豚鼠α肌動(dòng)蛋白(α Actin)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)耗氧量分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 226mg/L，體：水GHRP-Ghrelin(Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit  小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin豚鼠酪氨蛋白激受體A2(EphA2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)100mg/Lvaspin(Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制劑豚鼠周期素依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)224mg/LBrdU(Mouse Bromodeoxyuridine) ELISA Kit  小鼠溴脫氧核苷尿嘧豚鼠骨成型蛋白15(BMP-15)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)4940mg/LTGF Beta2(Mouse transforming growth factor Beta2) ELISA Kit  小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2豚鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SPC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

水質(zhì)化學(xué)需氧量標(biāo)樣套裝濃度范圍49.4-208（mg/L）,分3個(gè)梯度: 94Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  小鼠α1微球蛋白豚鼠抗心脂抗體IgG(ACA-IgG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分析標(biāo)準(zhǔn)品,含水質(zhì)MCP-4/CCL13(Mouse monocyte chemotactic protein 4) ELISA Kit  小鼠單核趨化蛋白4豚鼠D-二聚體(D2D)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 73.5 mg/LPPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit  小鼠過(guò)氧化物體增殖物激活受體α豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12 )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 121mg/LApo-E(Mouse Apolipoprotein E) ELISA Kit  小鼠載脂蛋白E豚鼠色素P450家族成員1A2(CYP1A2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

化學(xué)需氧量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)186mg/Lomentin(Mouse omentin) ELISA Kit  小鼠網(wǎng)膜素豚鼠Dickkopf 相關(guān)蛋白2(DKK2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

生化，化學(xué)需氧量（耗氧量）成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) BOD5：69.54mg/L，OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit  小鼠孤腓肽豚鼠白血病抑制因子受體(LIFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

二溴一標(biāo)準(zhǔn)溶液  0.77mg/ml，體：PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit  小鼠蛋白豚鼠接觸蛋白4(CNTN4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。