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微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
洋蔥伯克霍爾德氏菌 | 僅供科研 | GOY-01J6539
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
2,3-二溴丁二酸 98%乙偶姻 分析標準品,單聚體Anti-SM22 Alpha 骨架相關蛋白抗體
二乙烯三五乙酸 CP乙偶姻 Natural,≥96%(GC), FCCAnti-Smoothened/SMOH 跨膜蛋白Smoothened抗體
二乙烯三五乙酸 AR,99.0%2,3-丁二酮 98%Anti-Regucalcin/SMP30 衰老標記蛋白30抗體
鹽酸二 99%二氫錳 CPAnti-Snake poison Protein 蛇蛋白抗體(蝮蛇)
鹽酸二乙 CP,98%二氫錳 ARAnti-Snake poison Protein 蛇蛋白抗體(中華眼鏡蛇)
鹽酸二乙 AR,99%茜素綠 ARAnti-SNAP-25 突觸相關蛋白25抗體
鹽酸乙二 AR,99%2,2'-聯吡-4,4'-二甲酸 96%Anti-Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1 神經肌肉接頭蛋白SNTA1抗體
甲酰 CP,99.0%二氫錳 ARAnti-Snail Snail蛋白抗體
洋蔥伯克霍爾德氏菌滅蠅標準溶液 10μg/ml,u=2%Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體IgG豬葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)聯免疫吸附測定試劑盒
草津 分析標準品,98%Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體IgG豬碳酐XII(CA12)聯免疫吸附測定試劑盒
霜脲 分析標準品,98.5%Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體IgG豬II D組脂A2(PLA2G2D)聯免疫吸附測定試劑盒
順式菊酯 分析標準品,99%Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體IgG豬白活化黏附因子(ALCAM)聯免疫吸附測定試劑盒
四螨 分析標準品,98.6%Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體IgG豬胰高血糖素樣肽2(GLP-2)聯免疫吸附測定試劑盒
四螨標準溶液 100μg/ml,u=4%Anti-VTG/HRP 辣根過氧化物標記兔抗魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgG豬視黃誘導因/RIG-1樣受體(RLR)聯免疫吸附測定試劑盒
四螨標準溶液 10μg/ml,u=6%Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記腫瘤抑素抗體IgG豬BCL2相關死亡促進因子因子(BAD)聯免疫吸附測定試劑盒
滅幼脲 分析標準品,97%Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標記TWIST轉錄因子蛋白抗體IgG豬蛋白激C-ζ(PKCζ)聯免疫吸附測定試劑盒
滅幼脲標準溶液 100μg/ml,u=4%,酮Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物標記可溶性纖抗體IgG豬補體成分5a(C5a)聯免疫吸附測定試劑盒
滅幼脲標準溶液 10μg/ml,u=6%,酮Rabbit Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標記纖IgG豬Apelin蛋白(APLN)聯免疫吸附測定試劑盒
分析標準品,99%(劇品)Goat Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物標記羊抗人纖豬胱抑素C(Cys-C)聯免疫吸附測定試劑盒
標準溶液 100μg/ml,u=3%(劇品)Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標記酪氨羥化抗體IgG豬腫瘤蛋白p63(TP63)聯免疫吸附測定試劑盒
標準溶液 10μg/ml,u=6%(劇品)Anti-TNK1/FITC 熒光素標記非受體型酪氨蛋白激Tnk1抗體IgG豬β肌動蛋白(β-actin)聯免疫吸附測定試劑盒
芐草隆 分析標準品,99.5%Anti-Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標記化非受體型酪氨蛋白激Tnk1抗體IgG豬心肌肌鈣蛋白T(c/TNNT2)聯免疫吸附測定試劑盒
丁硫溶液100μg/ml,溶劑:酮Anti-Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055)/FITC 熒光素標記化非受體酪氨蛋白激2抗體IgG豬性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)聯免疫吸附測定試劑盒
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