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大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
6-溴-1-己烯 2695-47-8卡洛磺鈉τ-蛋白激酶1(τPK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
6-溴-1-己烯 2695-47-8奧美拉唑強啡肽(Dyn)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
6-溴-1-己烯 2695-47-8維生素B2甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3泛酸鈣甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3烏苯美司甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1阿苯達(dá)唑上皮型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1苯磺酸氨氯地平凋亡相關(guān)因子配體(FASL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
D-erythro-sphingosine-1-phosphate 26993-30-6鹽酸特拉唑血紅素結(jié)合蛋白(HPX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥98%
5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4氨力農(nóng)蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
5-溴-2-苯基吡啶 27012-25-5更昔洛韋蛋白激酶N2(PKN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1腎上腺色腙CD3d分子(CD3d)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1紫杉Toll樣受體1(TLR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9大蒜素Toll樣受體3(TLR3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9豆腐果苷骨形成蛋白1(BMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Newcastle disease virus
人血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 用途: 固氮
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium brevicompactum
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA Kit,48T/96T用途: 分類、研究,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒細(xì)胞SPHK2激酶活性熒光定量 FERMT1 (Fermitin family homolog 1) 100 ul
組織SPHK2激酶活性熒光定量 FLAD1 (FAD synthase) 20 ul
細(xì)胞SPHK激酶總活性熒光定量 ESPL1 (Separin) 100 ul
組織SPHK激酶總活性熒光定量 FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) 100 ul
細(xì)胞Akt1/PKBa激酶活性定量(A/B/C) FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) 20 ul
組織Akt1/PKBa激酶活性定量(A/B/C) EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) 100 ul
細(xì)胞Akt2/PKBβ激酶活性定量(A/B/C) EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) 100 ul
組織Akt2/PKBβ激酶活性定量(A/B/C) TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) 100 ul
細(xì)胞Akt3/PKBγ激酶活性定量(A/B/C) EEF2 (Elongation factor 2) 100 ul
組織Akt3/PKBγ激酶活性定量(A/B/C) EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) 500 ul
細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量(A/B/C) ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) 100 ul
組織Akt/PKB激酶總活性定量(A/B/C) ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) 100µl
細(xì)胞AURORA-A激酶活性定量(A/B/C) EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) 100 ul
組織AURORA-A激酶活性定量(A/B/C) EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) 100 ul
細(xì)胞AURORA-B激酶活性定量(A/B/C) ERAS (GTPase ERas) 100 ul
組織AURORA-B激酶活性定量(A/B/C) ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) 100 ul
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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