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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> 乙醛脫氫酶(ALDH)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6347 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6347 |
商品介紹
測(cè)定意義 乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動(dòng)物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時(shí),乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。 測(cè)定原理 在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
CD68抗體Human CEP55 ELISA Kit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)ELISA試劑盒,
緊密連接蛋白1抗體Human CD94 ELISA Kit大鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒,
膜輔蛋白抗體Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit大鼠促皮質(zhì)(ACTH)ELISA試劑盒,
CXC趨化因子16抗體Human CEP63 ELISA Kit豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒,
色素c氧化IV亞型1抗體Human CEP350 ELISA Kit鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,
1號(hào)染色體開放閱讀框227抗體Human CDC14B ELISA Kit庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
2號(hào)染色體開放閱讀框71抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit緩沖李氏增肉湯基礎(chǔ)添加劑每支加入225ml緩沖李氏增肉湯基礎(chǔ)中
質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Human CEP44 ELISA KitD-脯甲酯鹽酸鹽
乙醛脫氫酶(ALDH)微量法檢測(cè)試劑盒葒草苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%人Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒早期B淋巴因子2抗體Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體
千層紙素A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人Ⅲ型膠原蛋白(COL Ⅲ)免疫試劑盒ELAVL2蛋白抗體NKR/Neurokin B receptor 神經(jīng)激肽B受體抗體
紫草素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體NKG2D/CD314/KLRK1 NK受體2D抗體
毛蕊花糖苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品人3氧代5α類固4脫氫2(SRD5A2)免疫試劑盒同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體NKG2C NK受體2C抗體
漢黃芩甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人3型1-鞘氨受體(S1P3)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體NKG2A NK受體2A抗體
花椒酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%人3-硝酪氨(3-NT)免疫試劑盒谷氨受體KA1抗體NKB 神經(jīng)激肽B抗體
9-蒽 99%人3-羥-3-戊二酰輔A合1(HMGCS1)免疫試劑盒真核翻譯起始因子3K抗體NKA 神經(jīng)激肽A抗體
9-蒽 98%人3-葡萄糖苷孕二(PdG)免疫試劑盒早期生長反應(yīng)蛋白3抗體NK-2R 神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體
9-蒽 98%人Ⅱ型前膠原羧端肽(PⅡCP)免疫試劑盒EMSY蛋白抗體Nitrotyrosine 硝酪氨抗體
二 AR,98%人Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)免疫試劑盒FBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體NIT2 NIT2蛋白抗體
二 GR,99%人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫試劑盒T1蛋白抗體NIT1 水解1抗體
9-芴 99% 人Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒RAB6蛋白抗體NIS 鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體
9-芴酮 99%人Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)免疫試劑盒皮卡丘素抗體NIRF/RNF107 環(huán)指蛋白107抗體
2-(4-羥)乙 98%人Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒ELAVL4蛋白抗體NIR2 膜脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體
環(huán)已 CP,98%人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒因子樣激素受體1NIR1/RDGBA3 膜相關(guān)脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
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