產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標(biāo)本中，少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。少突膠質(zhì)細(xì)胞（oligodendrocyte）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、前少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細(xì)胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是，細(xì)胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程，其形態(tài)、表達(dá)產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴(yán)格的界限，因此，其分類是相對的。這三型分別為：Ⅰ型少突膠質(zhì)細(xì)胞又稱前O2A（pre-O2A progenitor cell）。細(xì)胞呈圓形，表面光滑，直徑約3μm，體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面，具有很強(qiáng)的分裂增殖潛力，表達(dá)GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細(xì)胞胞體常有雙極或三極突起，極少數(shù)為單極突起，直徑約7μm，有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細(xì)胞，既可分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì)，故又稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細(xì)胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表達(dá)GM1和波形蛋白外還表達(dá)GD3和GQ（淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體），故常用A2B5抗體標(biāo)記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細(xì)胞不再具有分裂增殖能力，為分裂終期細(xì)胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力，又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細(xì)胞。不成熟的OL胞體常伸出4～5條較粗大突起，表面還殘留有A2B5標(biāo)記物，同時也表達(dá)O1-O4抗原，無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞突起有如蜘蛛網(wǎng)，大量表達(dá)半乳糖腦苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞（簡稱少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞，前兩者具有增殖能力。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用消化、混合細(xì)胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R308

換液頻率每2-3天換液一次；

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)雙極、多極形

傳代特性不傳代，不增殖，存活1-2周

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細(xì)胞Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細(xì)胞AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

組織AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）  20次

細(xì)胞AURORA-B激酶活性

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞營養(yǎng)肉湯 (NB)   進(jìn)口、國產(chǎn)Nutrient Broth一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔子前列腺素A2 免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

營養(yǎng)瓊脂 (NA)   進(jìn)口、國產(chǎn)Nutrient Agar細(xì)菌計數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔子前列腺素A1 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基     進(jìn)口、國產(chǎn)Lactose Bile Broth用于大腸菌群，糞大腸菌群，大腸桿菌的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基    進(jìn)口、國產(chǎn)Lactose Broth用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒*直銷

去氧膽酸鹽瓊脂     進(jìn)口、國產(chǎn)Desoxycholate Lactose Agar用于大腸桿菌固體平板測定,腸道菌選擇性分離250兔子皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

MR-VP培養(yǎng)基     進(jìn)口、國產(chǎn)Methyl Red Voges Proskauer Broth用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))250兔子(Cortisol)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)    進(jìn)口、國產(chǎn)Violet Red Bile Agar用于大腸菌群的固體平板檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))250兔子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂     進(jìn)口、國產(chǎn)Simmons Citrate Agar用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))250兔子黏多糖/糖胺聚糖免疫試劑盒*直銷

腸道菌計數(shù)瓊脂 (VRBDA)     進(jìn)口、國產(chǎn)Violet Red Bile Dextrose Agar  用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)250兔子腦鈉素(BNP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

菌種保存培養(yǎng)基   進(jìn)口、國產(chǎn)Strain Store Medium用于常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?50兔子內(nèi)皮抑素(ES)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。