大鼠牙胚細(xì)胞-上海谷研實業(yè)有限公司

貨號	GOY-01X1392

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱	大鼠牙胚細(xì)胞
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類	原代細(xì)胞
貨號	GOY-01X1392

商品介紹：

名稱 大鼠牙胚細(xì)胞

2.組織來源：牙胚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠牙胚細(xì)胞分離自牙胚組織；牙胚是牙齒最開始發(fā)育階段的形態(tài)，是由牙板向深層的結(jié)締組織內(nèi)伸延，在其最末端細(xì)胞增生，進一步發(fā)育成牙胚。牙胚有三部分組成：①成釉器（enamel organ），起源于口腔外胚層，形成釉質(zhì)；②牙乳頭（dental papilla），起源于外胚層間充質(zhì)，形成牙髓和牙本質(zhì)；③牙囊（dental sac），起源于外胚層間充質(zhì)，形成牙骨質(zhì)、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的發(fā)生是口腔上皮和外胚間充質(zhì)相互作用的結(jié)果。在胚胎的第5周，覆蓋在原口腔的上皮由兩層細(xì)胞組成，外層是扁平上皮細(xì)胞，內(nèi)層為矮柱狀的基底細(xì)胞。在未來的牙槽突區(qū)，深層的外胚層間充組織誘導(dǎo)上皮增生，開始僅在上下頜弓的特定點上，上皮局部增生，很快增厚的上皮相互連接，依照頜骨的外形形成一馬蹄形上皮帶，稱為原發(fā)性上皮帶。在胚胎的第7周，這一上皮帶繼續(xù)向深層生長，并分裂為兩個：向頰（唇）方向生長的上皮板稱前庭板，位于舌（腭）側(cè)的上皮板稱為牙板（dental lamina）。在胚胎的第8~10周，前庭板繼續(xù)向深層生長，與發(fā)育的牙槽嵴分開，前庭板表面上皮變性，形成口腔前庭溝。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠牙胚細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠牙胚細(xì)胞經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R305

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

100uL 植物gamma-TIP PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

2 ug pMIB V5-His B pMIB V5-His B 低溫運輸，-20℃保存

月示蛋白胨 Proteose Peptone 250g

1瓶 SK-LU-1 [SKLU-1;SKLU1]細(xì)胞株 SK-LU-1 [SKLU-1;SKLU1] 低溫運輸和保存

10mL 超級雜交液（芯片） SuperHyb Solution for Chip -20℃保存

100g 9,10- 二甲基 -1,2 苯并蒽

大鼠牙胚細(xì)胞HBI志賀氏菌生化鑒定條(GB) 英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒兔子硬骨素(SOST)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

HBI變形桿菌生化鑒定條(GB) 英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒兔子胰高血糖素(GC)免疫試劑盒*直銷

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HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB) 英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒進口、分裝

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HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB) 英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒兔子血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒進口、分裝

HBI乳酸菌生化鑒定條(GB) 英文名稱：產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒兔子血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

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