微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

周期素D2抗原Anti-CENPQ Antibody豬TU3A蛋白（TU3A）elisa定量檢測試劑盒

周期素D3抗原Anti-CENPU Antibody豬雙皮質(zhì)（DCX）elisa定量檢測試劑盒

色素P450 3A4抗原Anti-CEP135 Antibody猴蛋白激活受體4（PAR4）elisa定量檢測試劑盒

富半胱肝素結(jié)合蛋白61抗原Anti-CEP131 Antibody豬賴氨酰氧化樣蛋白4（LOXL4）elisa定量檢測試劑盒

人巨病UL23抗原Anti-CEP135 Antibody豬巨噬趨化因子（MCF）elisa定量檢測試劑盒

多巴受體-D1抗原Anti-CEP152 Antibody豬GATA結(jié)合蛋白1（GATA1）elisa定量檢測試劑盒

多巴受體-D3抗原Anti-CEP170 Antibody猴可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1（sTfR1）elisa定量檢測試劑盒

多巴受體-D4抗原Anti-CEP152 Antibody猴脂質(zhì)運載蛋白2（LCN2）elisa定量檢測試劑盒

沙鏈霉菌高效氟菊酯標(biāo)準溶液 100μg/ml,u=2%，體:石油大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫試劑盒組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗兔IgG

高效氟菊酯標(biāo)準溶液 10μg/ml,u=3%，體:石油大鼠Toll樣受體9(TLR9)免疫試劑盒透明質(zhì)及粘蛋白4抗體Goat anti-Rabbit IgG whole serum  羊抗兔IgG抗血清

高效氟菊酯 分析標(biāo)準品，96%大鼠Toll樣受體7(TLR-7)免疫試劑盒神經(jīng)特異性鈣結(jié)合蛋白抗體Goat Anti-rabbit IgG  羊抗兔IgG

氟菊酯標(biāo)準溶液 100μg/ml,u=4%，體：正己烷大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒無毛發(fā)蛋白抗體Goat Anti-Mouse IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

氟菊酯標(biāo)準溶液 10μg/ml,u=5%，體：正己烷大鼠toll樣受體3(TLR3)免疫試劑盒心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

菊酯 分析標(biāo)準品，97.5%大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒乙?；M蛋白H4(K16)抗體Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

菊酯標(biāo)準溶液 100μg/ml,u=3%大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期因1(TIEG1)免疫試劑盒人類白抗原G抗體（N端）Goat Anti-Mouse IgM/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

菊酯標(biāo)準溶液 10μg/ml,u=6% 大鼠Tau蛋白免疫試劑盒人類白抗原G抗體（C端）Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

百菌清 分析標(biāo)準品，99%大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)免疫試劑盒缺氧誘導(dǎo)因95抗體Goat Anti-Mouse IgM/PE  PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

百菌清標(biāo)準溶液 100μg/ml,u=4% 大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒泛素蛋白連接E2抗體Goat Anti-Mouse IgM/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

百菌清標(biāo)準溶液 10μg/ml,u=6% 大鼠Smad7 免疫試劑盒同源盒蛋白HOXC9抗體Goat Anti-Mouse IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

磺隆 分析標(biāo)準品，92%大鼠Smad1 免疫試劑盒環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體Goat Anti-Mouse IgM/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

嘧磺隆 分析標(biāo)準品，98.5%大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體Goat Anti-Mouse IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

滅蠅 分析標(biāo)準品，99.5%大鼠S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體Goat Anti-Mouse IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

滅蠅標(biāo)準溶液 100μg/ml,u=2%大鼠S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒同源盒蛋白H6亞型2抗體Goat Anti-Mouse IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM