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上海谷研實業(yè)有限公司
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鞏膜成纖維細(xì)胞

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:02:27瀏覽次數(shù):162次

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elisa檢測試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
PCR試劑盒
培養(yǎng)基
感覺態(tài)細(xì)胞
PCR檢測試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
質(zhì)粒
熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
貨號 GOY-01X1380
鞏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:琥珀單酯 規(guī)格: 100mg
木犀草-7-O-新橙皮糖 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
規(guī)格: 20mg
39011-91-1羥基芍藥;oxypaeoniflori 規(guī)格: 20mg
130-86-9原 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
規(guī)格: 1g
6155-35-7鼠李糖;L-Rhamse moh 規(guī)格: 100mg
59-30-3葉 規(guī)格: 20m

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

鞏膜成纖維細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細(xì)胞

貨號

GOY-01X1380

商品介紹:

名稱 鞏膜成纖維細(xì)胞

2.組織來源:鞏膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

鞏膜成纖維細(xì)胞分離自鞏膜組織,鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯(lián)接角膜,后方與視神經(jīng)的鞘膜延續(xù)。鞏膜在視神經(jīng)穿出部附近最厚,愈前愈薄,在肌腱附著處又復(fù)增厚(鞏膜厚度:后極部1mm,赤道部0.40.5mm,直肌附著處0.3mm)。其與角膜交界處,外面有環(huán)形的角膜溝,深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍(lán)色,成年為白色,老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結(jié)構(gòu)堅韌,有支持和保護眼內(nèi)組織的作用。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

()實驗室分離的人鞏膜成纖維細(xì)胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

()實驗室分離的人鞏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H242

換液頻率每2-3天換液一次;

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3-5代左右

消化液0.25%

使用方法:

收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2 ug pVL1393 pVL1393 低溫運輸,-20℃保存

225mlEC肉湯均質(zhì)袋  10個/包

1000 U 限制性內(nèi)切PvuII Restriction Endonuclease -20℃保存

250mL RNase-Free SSC(無RNase的SSC),20X   RNase-Free SSC,20X   常溫保存

1 管 BL21(AI)大腸桿菌 BL21(AI) E.coli Strain -80℃保存

2 ug pQETirs-system pQETirs-system 低溫運輸

鞏膜成纖維細(xì)胞多價蛋白胨 英文名稱:Polypeptone 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠5核苷酸(5-NT)免疫試劑盒進口、組裝

特殊蛋白胨 英文名稱:Peptone Special 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒進口、分裝

去氧膽酸鈉 英文名稱:Desoxycholate Salt 產(chǎn)品規(guī)格:100g 小鼠4-羥基壬烯酸(HNE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

酵母浸粉 英文名稱:Yeast Extract Powder 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)免疫試劑盒*直銷

豬胃消化粉 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒進口、組裝

豬膽粉 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒進口、分裝

酵母浸粉(進口) 英文名稱:Yeast Extract Powder 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

麥芽浸粉 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:200g 小鼠3-硝基酪(3-NT)免疫試劑盒*直銷

干酪素 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小鼠3-α羥基類固醇脫氫(Akr1c9)免疫試劑盒進口、組裝

水解乳蛋白 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 小

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