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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
Spongiibactermarinus | 僅供科研 | GOY-01J6423 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
N,N-二甲基乙二 98%環(huán)甲 98%Inhibin 人抑制素
N,N-二甲基芐 CP,98.0%環(huán)甲 ≥99.5% (GC)Human t-PA/ELISA 人組織型纖溶原激活劑
N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三 99%環(huán)基酮 98%Humen PAI-1/ELISA 人原激活抑制物ELISA試劑盒
四甲基乙二 用于電泳,99%5-氯-2-戊酮 96%Cardiotrophin 人心營養(yǎng)素-1
四甲基乙二 99%環(huán)乙炔 99%STM 人可溶性血栓調節(jié)蛋白
四甲基乙二 ≥99.5%(GC),重蒸餾(R)4-氯-3-羥基丁酸乙酯 95%HSP-60 Human 人熱休克蛋白-60
異酸基三乙氧基硅烷 95%(S)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯 96%SOD(Human Super Oxidase Dimutase) 人超氧化物歧化
碳酸亞乙烯酯 包含 <2% BHT穩(wěn)定劑,98%4-氯丁酸甲酯 98%IGF-BP3 人胰島素樣生長因子BP3
Spongiibactermarinus2,3-二 97%bFGF-9 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子9豚鼠微球粒蛋白1(MCRS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
5-氟酮 98%bFGF-4 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子4豚鼠BTG3關聯(lián)核蛋白(BANP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
7-氟 98%bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子6豚鼠骺蛋白聚糖(EPYC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
6-氟 98%aFGF-1 ELISA Kit 大鼠性成纖維生長因子1豚鼠抑瘤素M受體(OSMR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
5-氟 98%FASL ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子配體豚鼠胱天蛋白4(P4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
4-氟 98%FAS/CD95 ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子豚鼠DNA結合蛋白(DBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
-7-羧 97%EPO ELISA Kit 大鼠紅生成素豚鼠轉錄激活因子-5(ATF-5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
-5-羧 98%EPOR ELISA Kit 大鼠紅生成素受體豚鼠肝配蛋白A受體1 (EPHA1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
(RS)-1H--2-羧 97%Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1豚鼠白介素18(IL-18)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二氫 99%ECF ELISA Kit 大鼠嗜粒趨化因子豚鼠神經(jīng)激肽B(NKB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
CP,>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit 大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子豚鼠結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異喹啉羧 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷豚鼠無孢蛋白(ASPN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1--3- 97%CD30 ELISA Kit 大鼠CD30分子豚鼠TATA框結合蛋白相關因子13(TAF13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
2-啉 99%E-Cad ELISA Kit 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白豚鼠血管內皮生長因子受體1(VEGFR1/Flt1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
-3-羧酯 99%BTC ELISA Kit 大鼠β素豚鼠蛋白3(PR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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