實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    骨髓單個(gè)核細(xì)胞

2.組織來源：骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是（mononuclear cell）單個(gè)核細(xì)胞，而不是（Monocyte）單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同，利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核細(xì)胞采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H238

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)圓形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

2 ug pCSA110 pCSA110 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

硫酸錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 Manganese Sulfate Nutrient Agar 250g

5g L(+) 鼠李糖 L(+)Rhamnose Monohydrate 室溫保存

3%NaCl脫羧  20支

100 μg  Rapamycin（FRAP/mTOR抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

125mL Gelatin Solution,10%   Gelatin Solut

骨髓單個(gè)核細(xì)胞L型細(xì)菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基 英文名稱：L-Bacterial Hypertonic Salt Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α羥基丁酸脫氫(αHBDH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基 英文名稱：Glucose Asparagine Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒*直銷

肉膏酵母葡萄糖瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α-黑色素細(xì)胞刺激素(α-MSH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

含0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基 英文名稱：BCP Medium with 0.2% Soluble Starch 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

布魯氏菌培養(yǎng)基 英文名稱：Brucella Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α甘露糖苷(α Manase)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

布魯氏菌培養(yǎng)基抑菌劑 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5 小鼠αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)免疫試劑盒*直銷

水稻赤霉菌培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

FWA淡水魚類瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠αL艾杜糖苷酸(IDUA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

BG11培養(yǎng)基 英文名稱：BG11 Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

ISP培養(yǎng)基3 英文名稱：ISP Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒*直銷