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大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
突觸囊泡蛋白ⅩⅣ(SYT14)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 卵孢單端孢 1g
突觸囊泡蛋白Ⅻ(SYT12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 紫色直絲鏈霉菌 250mg
突觸囊泡蛋白ⅩⅢ(SYT13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 葡枝根霉 100g
突觸孔蛋白(SYNPR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 中國臺灣根霉 25g
突觸伸蛋白1(SYNJ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 彎孢菌 500g
突觸伸蛋白2(SYNJ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 帚狀曲霉 5g
突觸極蛋白2(SYNPO2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 冬菇屬 25g
紋蛋白(STRN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黑木耳 5g
石蛋白2(STON2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 谷氨酸棒桿菌 5MG
石蛋白1(STON1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 層迭靈芝 10mg
絲氨酸/蘇氨酸激酶19(STK19)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 0.5M in THF 微金放線菌 25ml
絲氨酸/蘇氨酸激酶16(STK16)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 0.5M in THF *鎖擲孢酵母 50ml
絲氨酸/蘇氨酸激酶11(STK11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 木拉克酵母 100g
絲氨酸/蘇氨酸激酶4(STK4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 粘孢白僵菌 25g
絲氨酸/蘇氨酸激酶3(STK3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 25g
絲氨酸消旋酶(SRR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 屎腸球菌 5g
抗藥蛋白(SRI)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 芽孢桿菌屬 100g
角鯊烯單加氧酶(SQLE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 腫大地桿菌 25g
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)elisa試劑盒通用型線粒體雙鏈DNA斷裂(DSB)免疫熒光分析 LAX1 100 ul
通用型線粒體DNA損傷(8-hydroxydeoxyguanosine)比色法定量 LCE1A 100 ul
非突觸體腦組織線粒體分離 LCK 1 Kit
植物線粒體粗提分離 LCA5 100 ul
植物活性線粒體分離 LBR 100 ul
植物高質(zhì)純化線粒體分離 LCE1B 100 ul
真菌/酵母細(xì)胞線粒體粗提分離 LARS 100 ul
真菌/酵母細(xì)胞活性線粒體分離 LARS2 100 ul
真菌/酵母細(xì)胞高質(zhì)純化線粒體分離 LARS 100 ul
純化線粒體蛋白質(zhì)濃度定量測定 LAS1L 100 ul
動物血小板線粒體粗提分離 LARS2 100 ul
動物血小板活性線粒體分離 KRT81 100 ul
動物血小板高質(zhì)純化線粒體分離 Langerin 100 ul
動物全血線粒體粗提分離 KRT6B 300 ul
動物全血活性線粒體分離 KRT80 100 ul
動物全血高質(zhì)純化線粒體分離 KC1 20 ul
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