當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 0.1ml/100μg0.2ml/200μgAnti-phospho-CyclinE(Thr395)抗體
中文名稱 | 磷酸化蛋白激酶B抗體 | 貨號 | GOY-01K65370 |
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規(guī)格 | 0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
別 名 Akt(Phospho-Ser473); AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PRKBA; Protein Kinase B Alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt; RAC Alpha;
產(chǎn)品名稱 | 中文名稱 | 貨號 |
Anti-phospho-CyclinE(Thr395)抗體 | 磷酸化蛋白激酶B抗體 | GOY-01K65370 |
英文名稱 Anti-phospho-CyclinE(Thr395)
中文名稱 磷酸化蛋白激酶B抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 細胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human AKT around the phosphorylation site of Ser473
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year.
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:標記二抗工作液:標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗前準備:
安裝步驟與維護一)一抗稀釋的準備:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個適合的稀釋比例,再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
二)DAB顯色液的制備實驗準備:在1毫升試劑E(DAB 底物液)中,加入1滴(約50微升)試劑D(DAB濃縮液),混合均勻,即配成DAB工作液。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配,配好后避光保存,6小時內(nèi)使用,剩余的液體應棄去。標本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘,請在顯微鏡下觀察顯色的情況,顯色充分后應將標本及時脫水封固。
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