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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

B瘤因子9抗體Human FREM1 ELISA Kit兔子血小板衍生生長因子（PDGF）ELISA試劑盒,

膽綠素還原抗體Human Frizzled 8 ELISA Kit兔子促甲狀腺素（TSH）ELISA試劑盒,

BIVM蛋白抗體Human FRS3 ELISA Kit腦鈉素/腦鈉尿肽（BNP）ELISA試劑盒--動物，人

血型Lewis A抗原抗體Human Frizzled 7 ELISA KitCBZ-L-

粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human Frizzled 10 ELISA Kit大薊苷  Pectolinarin

Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體Human Frizzled 9 ELISA Kit二氫辣椒素  Dihydrocapsaicin

骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體Human FRK ELISA Kit苦杏仁苷 Amygdalin

化非受體性蛋白激ETK抗體Human FOXD4 ELISA Kit2′-脫氧鳥苷-5′-三四鈉鹽

構(gòu)巢曲霉4- 97%人抗風(fēng)疹病IgG抗體(anti-RV IgG)免疫試劑盒胱氨抗體phospho-IRS1(Ser332/336)  化胰島素受體底物-1抗體

4-酚 98%人抗肺泡底膜抗體(ABM-Ab)免疫試劑盒胰凝蛋白B抗體phospho-IRS1(Ser312)  化胰島素受體底物-1抗體

4-乙 97%人抗紡錘體抗體(MSA)免疫試劑盒補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體phospho-IRS-1(Ser307)  化胰島素受體底物p-IRS-1/2抗體

對 98%人抗二氫嘧相關(guān)蛋白5(DPYSL5/CRMP5)抗體免疫試劑盒分化促進(jìn)因子77抗體phospho-IRS1(Ser302)  化胰島素受體底物-1抗體

2,4,6-三 98%人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)免疫試劑盒半胱氨蛋白抑制劑樣蛋白1抗體phospho-IRS1(Ser1101)  化胰島素受體底物-1抗體

(氧)三化 98%人抗蛋白3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)免疫試劑盒CTBS蛋白抗體Phospho-IRF7 (Ser471/472)  化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體

4-氧乙炔 99%人抗單鏈DNA(ssDNA)抗體/變性DNA抗體免疫試劑盒硫軟骨素β1/β-1,4-GalNAc-T抗體phospho-IRF3(Ser386)  化干擾素調(diào)節(jié)因子3抗體

4-正戊環(huán)己酮 98%人抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒硫軟骨素聚合3抗體Phospho-IRF3 (Ser396)  化干擾素調(diào)節(jié)因子3

4-正-丁-4-聯(lián) 98%人抗促卵泡素抗體(Anti FSH Ab)免疫試劑盒胎盤催素1/2抗體phospho-IRAK4(Thr345)  化白介素-1受體相關(guān)激4抗體

4-正戊氧乙酰 99%人抗促狀腺素受體抗體(TRAb)免疫試劑盒酪氨激C-SRC抗體Phospho-IRAK1 (Thr387)  化白介素-1受體相關(guān)激1抗體

4-正乙炔 98%人抗補(bǔ)體1q抗體(anti-C1q-antibody)免疫試劑盒化酪氨激C-SRC抗體Phospho-IRAK1 (Thr209)  化白介素-1受體相關(guān)激1抗體

4-正戊 97%人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)免疫試劑盒酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體Phospho-IRAK1 (Ser376)  化白介素-1受體相關(guān)激1抗體

1-溴-4-戊 97%人抗氨酰tRNA合成,線粒體(AARS2)抗體免疫試劑盒半胱氨延伸蛋白α抗體Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1361)  化胰島素受體β抗體

4-聯(lián) 98%人抗氨酰tRNA合成,質(zhì)(AARS)抗體免疫試劑盒磺轉(zhuǎn)移CSPS抗體Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345)  化胰島素受體β抗體

4-正戊聯(lián) 99%人抗表皮底膜抗體(EBMZ)免疫試劑盒富含半胱氨蛋白2抗體Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1185)  化胰島素受體β抗體

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。