實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    肺小動脈平滑肌細胞

2.組織來源：肺小動脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織；小動脈（smallartery），管徑在0.3～1mm之間，小動脈包括粗細不等的幾級分支，也屬肌性動脈。較大的小動脈，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌，外膜厚度與中膜相近，一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚，當平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時，其管腔可以*閉塞，而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi)，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮，可使血壓顯著上升。反之，當小動脈的平滑肌舒張時，則可使大量的血液流入毛細血管，外周阻力明顯下降，血壓降低。終末小動脈（terminal arteri-ole）的口徑為20～30μm；后小動脈（metar-teriole），又稱毛細血管前小動脈（precapil-lary arteriole）的口徑為12～15μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌，在毛細血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛細血管前括約肌（precapillary sphinc-ter），其收縮或舒張，可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。

5.方法簡介：

()實驗室分離的人肺小動脈平滑肌細胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的人肺小動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-H236

換液頻率每2-3天換液一次；

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

2 ug pBAD/Myc-His A pBAD/Myc-His A 低溫運輸，-20℃保存

5次 96孔板血液DNAout（真空法） 96 Microwell Plate Blood DNAOUT 常溫

2 ug pEF1/myc-His B pEF1/myc-His B 低溫運輸，-20℃保存

MRS瓊脂 MRS Agar 250g

1g 3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸 3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride （TMB 2HCl） 4-

肺小動脈平滑肌細胞氯、碘中和劑管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20 小鼠白介素2受體β(IL2rb/CD122)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

復(fù)方中和劑管（帶棉簽） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20 小鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)免疫試劑盒*直銷

季銨鹽類中和劑管（帶棉簽） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20 小鼠白介素29(IL-29)免疫試劑盒進口、組裝

季銨鹽類中和劑管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20 小鼠白介素28A(IL-28A)免疫試劑盒進口、分裝

液體沙氏培養(yǎng)基 英文名稱：Liquid Sabourand Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠白介素28(IL-28)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

沙氏瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Sabouraud’s Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠白介素27(IL-27)免疫試劑盒*直銷

匹克氏肉湯基礎(chǔ)B 英文名稱：Pick’s Broth Base B 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠白介素25(IL25/C19orf10)免疫試劑盒進口、組裝

R2A液體培養(yǎng)基 英文名稱：R2A Liquid Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠白介素23(IL-23)免疫試劑盒進口、分裝

MUG營養(yǎng)瓊脂（NA-MUG) 英文名稱：MUG Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：100g 小鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

伊紅美藍瓊脂（顆粒） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠白介素21(IL-21)免疫試劑盒*直銷