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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
摩氏摩根菌 | 僅供科研 | GOY-01J7467 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
肌肽二肽1抗體Human Mammaglobin B ELISA Kit葡聚糖T3
酸性線粒體肌酸激抗體Human PST(Pancreastatin) ELISA Kit人超敏生長(U S-GH)ELISA試劑盒,U S-GH ELISA
碳酸酐相關蛋白8抗體Human AXA1(apRataxin) ELISA Kit人環(huán)磷酰(CTX)ELISA試劑盒,CTX ELISA
鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit人二氫嘧樣2(DPYSL2)ELISA試劑盒,DPYSL2 ELISA
原癌基因CD39樣蛋白4抗體Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit人促分裂素原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)ELISA試劑盒,MAPKAPK3 E
膠原樣蛋白抗體Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒,
腫瘤易感性候選基因5抗體Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒,
鈣調蛋白激激β抗體Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒,
摩氏摩根菌二硫化四乙秋蘭姆 97%人脂肪甘油三酯脂(ATGL)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框151抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗豚鼠IgM
雄烯二酮 分析標準品,≥99%人脂肪分化相關蛋白(ADRP)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框78抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgM
雄烯二酮 99%人脂多糖結合蛋白(LBP)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框187抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗豚鼠IgM
蘆薈甙 分析標準品,≥97%人脂多糖/內素(LPS)免疫試劑盒21號染色體開放閱讀框59抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗豚鼠IgM
蘆薈甙 97%人脂蛋白脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框152抗體Rabbit anti-Guinea pig IgM whole serum 兔抗豚鼠IgM抗血清
牛蒡子苷元 分析標準品,>98% 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框165抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgM 兔抗豚鼠IgM
牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)人整合素連接激1(ILK-1)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框166抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗豚鼠IgG
積雪草苷 分析標準品,≥97%人整合素β4結合蛋白(ITGB4BP)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框173抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgG
黃芪皂苷 III 分析標準品,≥98%人整合素αM型(ITG αM/CD11b) 免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框24抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgG
黃芪皂苷 II 分析標準品,≥98%人整合素αⅤβ3(ITG αⅤβ3)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框30抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgG
土木香內酯 分析標準品,≥97%(HPLC)人整合素α4(ITGA4/CD49D)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框4抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgG
穗花牡荊甙 分析標準品,≥98% 人整合素α2(ITGA2)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框7抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE PE標記的兔抗豚鼠IgG
桃葉珊瑚苷 分析標準品,≥98%人整合素A5(ITGA5)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框79抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗豚鼠IgG
白果內酯 分析標準品,≥99%人真胰島素(TI)免疫試劑盒20號染色體開放閱讀框94抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的兔抗豚鼠IgG
巴卡丁 III 分析標準品,≥99%人真核延伸因子2(eEF2)免疫試劑盒21號染色體開放閱讀框37抗體Rabbit Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標記的兔抗豚鼠IgG
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