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Massiliaaerilata

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-07 11:11:54瀏覽次數:113次

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微生物菌種的培養(yǎng):

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。

⑵ 霉菌孢子的制備 

霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備 

搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備 

種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。

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產品名稱

用途

貨號

Massiliaaerilata

僅供科研

GOY-01J6444

 

菌種的培養(yǎng):

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
QQ截圖20220323162239.png

保存方法:

傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法:

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。

 AR,98.5%(劇品)野百合堿 分析標準品Anti-Gax/FITC  熒光素標記生長終止特異性同源盒基因抗體IgG

β-巰基乙 AR,99.0%(劇品)白屈菜紅堿 分析標準品,>98% Anti-GCK/FITC  熒光素標記抗葡萄糖激抗體IgG

發(fā)煙硝酸 GR木香烴內酯 分析標準品,>98%Anti-GCN2/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白抗體IgG

焦銻酸 AR,99.0%二氫丹參酮  分析標準品,≥98%Anti-Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白抗體IgG

焦亞 AR,95.0%2,6-二氯-3-硝基吡 97%Anti-phospho-GCN2 (Thr667) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白抗體IgG

AR,99.5%一枝蒿甲素 分析標準品,>98%Anti-GCS/FITC  熒光素標記谷半胱γ合成抗體IgG

CP,99.0%去甲氧基姜黃素 分析標準品,>98% Anti-CSF3/FITC  熒光素標記粒-巨噬集落激因子抗體IgG

亞氫 AR連翹苷  分析標準品,>97%Anti-G-CSFR/CSF3R/CD114/FITC  熒光素標記粒-巨噬集落激因子3受體抗體IgG

MassiliaaerilataAnti-WIP1/FITC  熒光素標記原癌因WIP1抗體IgG綿羊III型前膠原(PCIII)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

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Anti-WNK4/FITC  熒光素標記一種新的絲氨/蘇氨激家族成員的因WNK4抗體IgG綿羊泛素蛋白D(UBD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

Anti-Il-7R a(CD127)/RBITC  羅丹明標記白介素-7受體a抗體IgG綿羊抗補體1q抗體(C1q-Ab)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

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