產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠精原干細(xì)胞

2.組織來源：睪丸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠精原干細(xì)胞分離自睪丸組織；精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞，是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些*優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究，精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染，異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi)，精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程，精原干細(xì)胞（SSCs）一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量，另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至最后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處，是哺乳動物精子發(fā)生的最原始細(xì)胞，也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠精原干細(xì)胞采用先機(jī)械吹打、后消化，結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的小鼠精原干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-M160

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細(xì)胞形態(tài)球形

傳代特性可傳2-3代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

500mL Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X 常溫保存 0.312-20 ng/mL 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒

1mL 抗Ⅲ，10mg/mL Antithrombin III Solution 4℃一周內(nèi)穩(wěn)定 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Deoxypyridinoline

2 ug pTYB 4 pT?嵌?L?

小鼠精原干細(xì)胞50mL CM交換介質(zhì) CM Medium 常溫干燥封袋保存

Donkey anti-human IgG whole serum  驢抗人IgG抗清 規(guī)格: 1mlCBFA1/RUNX2  核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1 規(guī)格: 0.1ml

KCTD11  鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 規(guī)格: 0.2ml

CDX1  尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlIQCK  IQCK蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-NTRK2/TrkB (Tyr515)  磷酸化激B抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSPYL5  睪特異性Y蛋白樣5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/APC  APC標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

PCDHGC4  原鈣粘蛋白γC4抗體 規(guī)格: 0.2ml

SAA4/Serum amyloid A 4 protein  清淀粉樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlPMS2  瘤錯配修復(fù)基因PMS2抗體 規(guī)格: 0.1ml

G-CSFR/CD114  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3受體抗體 規(guī)格: 0.1mlJUP/Cateninma γ  γ連環(huán)蛋白抗體（Catenin γ ， γ鏈接素） 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198)  磷酸化P27抗體/周期素依賴激抑制劑抗體 規(guī)格: 0.1ml

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。