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貨號(hào)	GOY-01S6868

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	土壤幾丁質(zhì)酶微量法檢測(cè)試劑盒
規(guī)格	100管/48樣
檢測(cè)方法	微量法
貨號(hào)	GOY-01S6868

商品介紹：

測(cè)定意義

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測(cè)定原理

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進(jìn)一步與對(duì)二甲氨基產(chǎn)生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、水浴鍋、離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板，甲苯、蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(狀甲狀腺癌編碼蛋白)Human CPR(Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit人抗磷脂抗體（Apl/APA）ELISA試劑盒,Apl/APA ELISA kit

周期素依賴激2相關(guān)蛋白2抗體Human CPP(Copeptin) ELISA Kit人抗核抗體（ANA）ELISA試劑盒,ANA ELISA

1號(hào)染色體開放閱讀框201抗體Human CPE(Carboxypeptidase E) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）ELISA試劑盒,PA-IgG/M/A ELI

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human CREB(Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ELISA Kit人抗中性粒核周抗體（pANCA）ELISA試劑盒,pANCA ELISA

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白80抗體Human CR1(Complement Receptor type 1) ELISA Kit人鉤端螺旋體IgM（Lebtospira）ELISA試劑盒,Lebtospira ELISA

CD163蛋白樣1抗體Human CX26(Connexin 26) ELISA Kit人肽基脯氨酰順反異構(gòu)（PPI）ELISA試劑盒,

周期素依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體Human COL5α2(Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit人組織蛋白D（cath-D）ELISA試劑盒, cath-D ELISA

22號(hào)染色體開放閱讀框31抗體Human CRLF1(Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit人胰激肽原（PK）ELISA試劑盒, PK ELISA

土壤幾丁質(zhì)酶微量法檢測(cè)試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

豬αN乙酰葡糖胺糖苷(NAGLU)免疫試劑盒*直銷

大鼠甘肽S轉(zhuǎn)移P(GSTP1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

羊抗單鏈DNA抗體/變性DNA(ssDNA)抗體免疫試劑盒*直銷

犬結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)免疫試劑盒*直銷

大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換1(ECE1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠肺炎支原體(MP)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。