微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

FMOC-肌 98%標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=6～4%，酮（劇品）Anti-VEGF/FITC  熒光素標(biāo)記VEGF抗體IgG

N-FMOC-L-1,2,3,4-四羥基異喹啉-3-甲酸 97%哌草丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%Anti-VEGF(Rabbit)/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子抗體IgG

FMOC-N-甲基-L- 97%噻節(jié)因 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Anti-VEGF-A/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子A抗體IgG

Fmoc-N-甲基-L-天冬 4-叔丁酯 98%甜菜安 分析標(biāo)準(zhǔn)品，97%Anti-VEGF-B/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子B抗體IgG

Fmoc-N-甲基-L-谷 5-叔丁酯 98%野燕枯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%Anti-VEGF-C/FITC  熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子C型抗體IgG

Fmoc-N-甲基-L-異亮 98%異菌脲 分析標(biāo)準(zhǔn)品，96%Anti-VEGF-D/FIGF/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠血管內(nèi)皮生長因子D型VEGFD抗體IgG

Fmoc-N-甲基-L-亮 99%異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%Anti-VEGF/RBITC  羅丹明標(biāo)記VEGF抗體IgG

N-Fmoc-N-甲基-O-叔丁基-L- 98%異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6% Mouse Anti-human VEGF/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgG

雅致枝霉鹽西替利 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素氧合-1/熱休克蛋白-32抗體IgG豬血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

5-氧化 98%Anti-HO-1/HSP32/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素氧合-1/熱休克蛋白-32抗體IgG豬CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2-(二環(huán)己膦)聯(lián) 98%Anti-HO-2/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素氧合-2抗體IgG豬轉(zhuǎn)錄激活因子-2(ATF-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2,6-二氟-4-羥 98%Anti-HOXA10 /FITC  熒光素標(biāo)記HOXA10抗體IgG豬粘蛋白17(MUC17)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2，4-二巰嘧 98%Anti-HOXB4/FITC  熒光素標(biāo)記HOXB4抗體IgG豬外信號調(diào)節(jié)激3(ERK3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(S)-(+)-2,2-二環(huán)烷酰 98%Anti-PSGD/HOXB13/FITC  熒光素標(biāo)記同源盒蛋白HOXB13抗體IgG豬尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(S, S)-環(huán)己二 98%Anti-HOXc8/FITC  熒光素標(biāo)記同源盒因的一種抗體IgG豬血管性血友病因子(VWF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(R, R)-環(huán)己二 98%Anti-Hpt/HP /FITC  熒光素標(biāo)記結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體IgG豬絨毛膜促性α肽(CGα)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

N,N’-二(氨乙)-哌 99%Anti-HPV/FITC  熒光素標(biāo)記人類狀瘤病抗體IgG豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

3,5-二氟芐 97%Anti-HPV16-E6/E6 protein/FITC  熒光素標(biāo)記人類狀瘤病16抗體IgG豬成纖維生長因子7(FGF7/KGF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

羥哌 97%Anti-HPV16/18 protein/FITC  熒光素標(biāo)記人類狀瘤病16/18抗體IgG豬粘蛋白13(MUC13)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2,6-二并噻唑 98%Anti-HPV18-E6/E6 protein /FITC  熒光素標(biāo)記人類狀瘤病18抗體IgG豬氨端前腦鈉素(NT-proBNP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

6,6′-二-2,2′-聯(lián)吡 98.0 %Anti-HPV16-E7/E7 protein/FITC  熒光素標(biāo)記人類狀瘤病16-E7抗體IgG豬瘦素(LEP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1-乙-(3-二氨)碳二亞鹽鹽 98.5% Anti-H-ras/FITC  熒光素標(biāo)記原癌因H-ras抗體IgG豬血小板相關(guān)補體3(PAC3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2-氨噻唑-4-乙酯 98%Anti-Hrasls3/HREV107/FITC  熒光素標(biāo)記HRAS樣抑制因子3抗體IgG豬前列腺特異性抗原(PSA/KLK3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒