當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進口elisa試劑盒>>大鼠elisa試劑盒>> 48T/96T大鼠雌二醇(E2)elisa試劑盒
實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠雌二醇(E2)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat Estradiol,E2 ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74393 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
精胺氧化酶(SMOX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 馬闊里類芽孢桿菌 25g
絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長鏈堿性亞基1(SPTLC1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 球孢白僵菌 5g
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 25g
5羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(SERT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 球孢鏈霉菌 5g
3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 平菇 1g
鈣調(diào)蛋白樣蛋白5(CALML5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 玫煙色棒束孢 5g
軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98%(GC) 污黑腐皮殼 25ml
AF4/FMR2家族成員1(AFF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98%(GC) 熱帶假絲酵母 5ml
白介素1家族成員9(IL1F9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 大西洋魯杰氏菌 100g
基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 滑菇 25g
次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 缺陷短波單胞菌 5g
WNT抑制因子1(WIF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 1.00mg/ml 毛木耳 1ml
腎足蛋白(NPHN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97%, FG 大腸桿菌 100g
CD200分子(CD200)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97%, FG 聚生殼菌 25g
干擾素α/β受體2(IFNα/βR2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97%, FG 芽孢桿菌 5g
腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(APRT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ChiPros 99%, ee 99% 禾生炭疽菌 1g
脫氧胞苷激酶(DCK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ChiPros 99%, ee 99% 緊密帚枝霉 25g
可溶性胸苷激酶1(TK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ChiPros 99%, ee 99% 三葉草根瘤菌 5g
大鼠雌二醇(E2)elisa試劑盒腺苷脫氨酶(ADA)定量 TIRAP(Toll/interleukin-1 receptor domain-containing adapter protein) 100 ul
酵母腺苷脫氨酶(ADA)定量 HACE1(E3 ubiquitin-protein ligase HACE1) 100µg
細胞5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量 ADAMTS18(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 18) 100 ul
組織5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量 SORCS1(VPS10 domain-containing receptor SorCS1) 100 ul
血液5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量 NOTCH3(Neurogenic locus notch homolog protein 3) 500µl
細胞α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量 NAT8L(N-acetylaspartate synthetase) 100 ul
組織α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量 PSTK(L-seryl-tRNA(Sec) kinase) 100 ul
血液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量 ST6GAL1(Beta-galactoside alpha-2,6-sialyltransferase 1) 100 ul
體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量 SWAP70(Switch-associated protein 70) 100 ul
細胞α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量 TMEM126A(Transmembrane protein 126A) 20 ul
組織α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量 ENHO(Adropin) 1 Kit
血液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量 TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) 100 ul
體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量 DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) 20 ul
細胞總脂肪酶(lipase)活性比色法定量 TBC1D1(TBC1 domain family member 1) 100 ul
組織總脂肪酶(lipase)活性比色法定量 TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) 100 ul
血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量 THAP4(THAP domain-containing protein 4) 100 ul
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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