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保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
萊氏曼氏乳桿菌 | 僅供科研 | GOY-01J7499 |
菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
促皮質(zhì)(1-39)抗體Human KIF3A ELISA Kit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒,
促皮質(zhì)ACTH(18-39)抗體Human KIAA0125 ELISA Kit人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒,
促皮質(zhì)ACTH (7-23)抗體Human KIAA0087 ELISA Kit人血小板相關(guān)球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒,
活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體Human KIAA0141 ELISA Kit小鼠丙酮酸激M2型同工(M2-PK)ELISA試劑盒,
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體Human KIAA0182 ELISA Kit小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒,
α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)Human KCTD5 ELISA Kit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒,
化水通道蛋白2抗體Human KIAA0430 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒,
轉(zhuǎn)氨抗體Human KDM2A ELISA Kit大鼠因子受體(EGFR)ELISA試劑盒,
萊氏曼氏乳桿菌3--4-氨吡 98%人結(jié)合蛋白(DBP)免疫試劑盒表面趨化因子受體1抗體PPP2R3A 蛋白質(zhì)2調(diào)節(jié)亞3A抗體
吡咯-2-羧酯 98%人3(VD3)免疫試劑盒表面趨化因子受體2抗體PPP2R3 蛋白質(zhì)2A亞3抗體
1-咪唑-5- 95%人2(VD2)免疫試劑盒表面趨化因子受體3抗體PPP2R1B 蛋白質(zhì)2調(diào)節(jié)亞1B抗體
對異酯 98%人C(VC)免疫試劑盒表面趨化因子受體4抗體PPP2R1A 蛋白質(zhì)2調(diào)節(jié)亞1A抗體
4-硝吡唑 97%人B6(VB6)免疫試劑盒活化半胱蛋白蛋白-3抗體PPO 腺樣癌特異性相關(guān)抗原PPO抗體
吡-3,4-二羧 98%人B3(VB3)免疫試劑盒抗Ⅵ型膠原抗體PPM2C 蛋白2C抗體
2,6-吡二 97%人B2(VB2)免疫試劑盒半胱氨蛋白8抗體PPM1G 蛋白質(zhì)1G抗體(PP2Cγ)
4-磺酰異酯 96%人B12(VB12)免疫試劑盒信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞8抗體PPM1F 鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激抗體
2-(三乙酰)吡咯 99%人B1(VB1)免疫試劑盒表面趨化因子受體10抗體PPM1B 蛋白質(zhì)1B抗體(PP2Cβ)
鹽多巴 98%人A(VA)免疫試劑盒轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體PPIL1 親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體
(±)-α-煙酚人微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體PPIG 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體
反二 CP,99.0%人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)免疫試劑盒周期檢測點激1抗體PPIB/Cyclophilin B 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體
碳胍 99%人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)免疫試劑盒鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體PPIA/Cyclophilin A 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體
異抗壞血鈉 98%人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)免疫試劑盒尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體PPHLN1 脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50)
三氧化二銻 SP人微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)免疫試劑盒周期素H抗體PPARGC1A/PGC1 α 過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體
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