保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

甲標(biāo)準(zhǔn)溶液1.20-1.43mg/L除草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit  小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

甲 用于分子生物學(xué), ≥36.0% in H2O (T)鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 100(20℃)μg/mL，基體:1%HNO3HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit  小鼠血紅素氧合1

鐵 AR，F(xiàn)e 21-23 %硝酸根離子(NO5-)標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml,溶劑:水PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit  小鼠磷脂A2

鐵 CP，F(xiàn)e 21-23 %硝酸根離子(NO6-)標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,溶劑:水TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit  小鼠組織因子途徑抑制物

鐵 植物培養(yǎng)級(jí),Fe 21-23 %釹標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，基體：10%HClAQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit  小鼠水通道蛋白5

鐵(III) 水合物 99.95% metals basis氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 100.0mg/L，基體:H2SO4AQP-4(Mouse Aquaporin 4) ELISA Kit  小鼠水通道蛋白4

亞鐵，七水 AR氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L(以N計(jì))，溶劑:水AQP-3(Mouse Aquaporin 3) ELISA Kit  小鼠水通道蛋白3

亞鐵，七水 99.99% metals basis標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.01mg/ml，基體：甲AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit  小鼠水通道蛋白1

糙皮側(cè)耳、平菇3--4-氨吡 95%兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)免疫試劑盒鈣粘蛋白23抗體RED/CSA2  軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體

-2-羧 98%兔子胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒色素p450 2s1抗體RECQL5  RecQ解旋樣蛋白5抗體

-3-羧 98%兔子胰島素(INS)免疫試劑盒角蛋白16抗體RECQL5  RecQ解旋樣蛋白5抗體

1-環(huán)戊 99%兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒半胱蛋白蛋白-6抗體recPEP  重組豬乙腦病結(jié)構(gòu)蛋白抗體

1--3- 97%兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒c-fos抗體RECK  金屬蛋白抑制因子RECK抗體

5-異噁唑-4- 98%兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框23抗體REC8  減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體

3,3-二烯酯 98%兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框25抗體RDH13  視黃脫氫13抗體

3--4- 99%兔子血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框30抗體RDH11  視黃脫氫11抗體（型肝炎病核心蛋白）

3-(5--1,2,4-噁二唑-3-) 97%兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框37抗體RCS1/FAM64A  染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體

4-(5--1,2,4-噁二唑-3-) 97%兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框40抗體RCL/c Myc responsive  c-Myc應(yīng)答蛋白抗體

6- 98%兔子血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框41抗體RCC2  染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體

7- 98%兔子心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框5抗體RCC1  染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體

4- 98%兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ 免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框50抗體RCBTB1/CLLD7  核苷交換因子抗體

N-間 97%兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ 免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框57抗體RCAN2/DSCR1L1  鈣調(diào)神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1）

1-吡唑 98%兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ 免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框6抗體R-cadherin/Cadherin 4  R-鈣粘附分子抗體