保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

4,4,4-三氟巴豆酸乙酯 98%十氫喹啉（順式+反式） 98%Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4)  Smad4抗原

3--4,4,4-三氟酸乙酯 97%3,3-二乙氧基酸乙酯 95%Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7)  Smad 7(多肽)

4,4,4-三氟乙酰乙酸乙酯 98%2-基-3,3-二苯基烯酸-2-乙基己酯 97%phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic  化SMAD(p-Ser425)抗原

羥基酪  98%3-乙氧基烯酸乙酯 98%SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25)  突觸相關(guān)膜蛋白25抗原

3-羥基 98%1-乙基 98%Snail  Snail蛋白抗原

1,2-戊二 98%金雀異黃酮 97%Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3)  因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗原

3,4-二氯苯甲 97%7-羥基-3,4-二氫-2(1H)-喹啉酮 97%SOD1(superoxide-dimutase-1)  超氧化物歧化1抗原

2,3-二氯甲苯 98.0%1-甲基 97%SOD2 (superoxide-dimutase-2)  超氧化物歧化2抗原

明亮發(fā)光桿菌N,N,N',N'-四-1,3-二 97%兔子質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框52抗體RAC2  G蛋白P21 RAC2抗體

納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm兔子質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框67抗體RAC1+RAC2  GTP結(jié)合蛋白RAC1+RAC2抗體

氮化鋁 N >33.0%， D50/2.0 μm兔子質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒1號染色體開放閱讀框83抗體RAC1/MIG5  遷移誘導(dǎo)因子5抗體

氮化鋁 N >32.5 % ，D97/5.0 μm兔子質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒富含半胱氨分泌蛋白3抗體RABX5/Rabex5  G蛋白相關(guān)RABX5抗體

納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%兔子肌鈣蛋白C(TnC)免疫試劑盒腫瘤/抗原26抗體RABGAP1  Rab蛋白GTP激活蛋白1抗體

納米鋇鐵氧體 200nm,99%兔子黃體生成素(LH)免疫試劑盒周期蛋白依賴性激抑制劑2C抗體Rabbit Anti-rat IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

納米鉍粉 99.9% metals basis,40nm,球形兔子環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒Cullin2抗體Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

三氧化二鉻 60nm 球形，98.0%兔子核因子-κB亞p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒鈣調(diào)蛋白激CaMK1D抗體Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

納米鐵鈷 40nm 球形 99.5%兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒CHX10蛋白抗體Rabbit Anti-rat IgM/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

納米碳粉 99.5%，30nm兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體(C端)Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

四氧化三鈷 30nm 球形，99.5%兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒周期蛋白依賴性激抑制劑2B抗體Rabbit Anti-rat IgM/PE  PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

氧化鏑 40nm 球形，99.5%兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體Rabbit Anti-rat IgM/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

石墨 99%，40nm兔子骨膠原交聯(lián)/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫試劑盒泛素連接蛋白CHFR抗體Rabbit Anti-rat IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

納米羥灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒Cullin1抗體Rabbit Anti-rat IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形兔子骨堿性(BALP)免疫試劑盒肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體Rabbit Anti-rat IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM