實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周?chē)陌?，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱(chēng)    小鼠表皮角化上皮細(xì)胞

2.組織來(lái)源：皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠表皮角化細(xì)胞分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化上皮細(xì)胞先中性消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠表皮角化上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M215

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2代左右

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

動(dòng)力--尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250g

5g 固藍(lán) RR 鹽 Fast Blue RR Salt -20℃保存

50T 風(fēng)疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒   低溫運(yùn)輸，-20℃保存

200mL Western印跡膜抗體清除劑 Western Blot Antibody Erasol 室溫保存

2 ug pBFPN1 FIV-BFP pBFPN1 FIV-BFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10mL DNA洗脫液  

2 ug pAAV-MCS pAA

小鼠表皮角化上皮細(xì)胞馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 英文名稱(chēng)：Potato Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

馬鈴薯葡萄糖水 英文名稱(chēng)：Potato Dextrose Water 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎素前體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

綜合馬鈴薯培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Intergrated Potato Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎素(Renin)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

麥芽汁培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Malt Extract Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

酵母浸出物葡萄糖土瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠腎上腺素(EPI)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 英文名稱(chēng)：Potato Dextrose Semisolid Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

沙氏葡萄糖瓊脂（USP） 英文名稱(chēng)：Sabouraud Dextrose Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

酪蛋白葡萄糖瓊脂 英文名稱(chēng)：Sabouraud Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒*直銷(xiāo)