操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測(cè)定意義

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測(cè)定原理：

堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成和，通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無(wú)水乙醇和甲苯。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

環(huán)指蛋白59抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit犬布魯氏桿探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human DPP10(Inactive dipeptidyl peptidase 10) ELISA Kit光滑念珠探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

甲羥戊酸激抗體Human SOX9(Transcription factor SOX-9) ELISA Kit空腸彎曲桿探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

甲羥戊酸脫羧抗體Human AMD1(S-adenosylmethionine decarboxylase proenzyme) ELISA Kit桿狀巴爾通體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

胞漿蘋(píng)果酸1抗體Human SLC25A5(ADP/ATP translocase 2) ELISA Kit包納米蟲(chóng)屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體Human NOTCH1(Neurogenic locus notch homolog protein 1) ELISA Kit蠣包拉米蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

微絲相關(guān)蛋白3樣抗體Human MIOX(Inositol oxygenase) ELISA Kit芽囊原蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Human VDR(Vitamin D3 receptor) ELISA Kit水牛正痘病探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

土壤酸性磷酸酶(SACP)微量法檢測(cè)試劑盒大鼠c-ros致癌基因1,受體酪激(ROS1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2,3-二甘油酸(2,3-DPG)免疫試劑盒*直銷

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