微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

Alexa Fluor 350標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRNPH2 Antibody小鼠表皮調(diào)節(jié)素（EREG）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素Cy3標(biāo)記兔抗FITCAnti-HNRNPLL Antibody大鼠阻抑素（PHB）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素PE-Cy3標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HORMAD1 Antibody大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1（FLT1/VEGFR1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素PE-Cy3標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRNPUL2 Antibody小鼠β己糖苷A（β-Hex A）elisa定量檢測(cè)試劑盒

熒光素Cy3標(biāo)記羊抗人IgAAnti-HNRNPUL2 Antibody小鼠微管蛋白α3c（TUBa3C）elisa定量檢測(cè)試劑盒

Alexa Fluor 350標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HOXA7 Antibody小鼠甲狀腺球蛋白（TG）elisa定量檢測(cè)試劑盒

Alexa Fluor 350標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-HNRPLL Antibody小鼠胸腺表達(dá)趨化因子（TECK）elisa定量檢測(cè)試劑盒

標(biāo)記牛血清白蛋白Anti-HOXB1 Antibody小鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（TNPO1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

間型酒香酵母氫鈣 AR，99.0 %GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT  人膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子兔β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L-鈣 USP級(jí)G-CSF(Human Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit  人粒集落激因子兔髓分化因子88(MYD88)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L- 85-90%NAP-2/CXCL7(Human neutrophil activating protein-2) ELISA Kit  趨化蛋白2兔免疫球蛋白G2(IgG2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L- 96%Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit   人趨化因子兔神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG-2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L- 分析標(biāo)準(zhǔn)品bFGF-9(Human basic fibroblast growth factor 9) ELISA Kit  人堿性成纖維生長(zhǎng)因子9兔核孔蛋白214kda(NUP214)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L- 98%bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit  人堿性成纖維生長(zhǎng)因子6兔成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

L-鈉 98%bFGF-4(Human basic fibroblast growth factor 4) ELISA Kit  人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4兔血管緊張肽A(ATA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

羧纖維素鈉 粘度: 800-1200mpa.s ,USP級(jí)aFGF-1(Human acidic fibroblast growth factor 1) ELISA Kit  人性成纖維生長(zhǎng)因子1兔成纖維生長(zhǎng)因子受體2(FGFR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

聚氧乙烯EL pH范圍： 6.0-8.0FASL(Human Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit  人凋亡相關(guān)因子配體兔粘蛋白13(MUC13)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

糖，無(wú)水 Ph Eur,USP,NF,JPFAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  人凋亡相關(guān)因子兔胎蛋白(αFP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硬脂鎂 AR，Mg 4.0-5.0%CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit  人E選擇素兔血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硬脂鎂 USP，EPCCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit  人嗜粒趨化蛋白兔胸苷合成(TS/TYMS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

十二烷硫鈉 Ph. Eur，USP級(jí)，92%ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  人鼠嗜粒趨化因子兔II型前膠原羧端原肽(PIICP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

葡聚糖10 分子量10000EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit  人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子兔甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

葡聚糖70 分子量 70000CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit  人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子兔抗生長(zhǎng)激素抗體(GHAb)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒