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選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒
英文名稱:Rat procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
2-氯-4-氟吡啶 34941-91-8黃精(黃精)骨成型蛋白10(BMP10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-氯-4-氟吡啶 34941-91-8白土苓(華南肖篳撥)同種異體移植炎癥因子1(AIF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
D-胱氨酸 349-46-2竹葉柴胡鞘氨1磷酸酯受體1(S1PR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
D-胱氨酸 349-46-2綠萍分揀蛋白1(SORT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
D-胱氨酸 349-46-2艾葉淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2(APLP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
三氟磺酸銅(Ⅱ) 34946-82-2鴨膽子鈣離子轉(zhuǎn)運ATP酶A2(ATP2A2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
三氟磺酸銅(Ⅱ) 34946-82-2杏葉防風尿調(diào)蛋白(UMOD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
三氟磺酸銅(Ⅱ) 34946-82-2五靈脂S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3,5-雙(三氟甲基)苯酚 349-58-6水防風S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥96%
3,5-雙(三氟甲基)苯酚 349-58-6固公果根蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥96%
3,5-二甲氧基芐胺 34967-24-3膏桐賴氨酰氧化酶(LOX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3,5-二甲氧基芐胺 34967-24-3大血藤胞裂蛋白6(SEPT6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
間三氟乙酮 349-76-8川西獐牙菜蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2α)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
間三氟乙酮 349-76-8刺梨葉GPI錨定分子樣蛋白(GML)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
間三氟乙酮 349-76-8刺梨果B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
人錨蛋白(ankyrin)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人通用轉(zhuǎn)錄復合體(GTC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus awamori
人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
人ω干擾素(IFN-ω)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var.hansenii
人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Sphingomonas asaccharolytica
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus clavatus Desmazleres
人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA Kit,48T/96T注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒小鼠結(jié)腸癌細胞,CT26.WT細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠結(jié)腸癌細胞,MC38細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠結(jié)腸細胞,CT26細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠巨噬細胞,Ana-1細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞,SVEC4-10細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠淋巴瘤細胞,EL-4細胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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